Центральная вкладка (pdf)
Оригинал статьи (pdf)
УДК 663.18:574.44
ВЛИЯНИЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ БАКТЕРИЙ РОДА BACILLUS НА МАССУ ПЕЧЕНИ
Г. А. НОЗДРИН, доктор ветеринарных наук, заведующий кафедрой НГАУ
С. Н. ТИШКОВ, аспирант НГАУ
А. Г. НОЗДРИН, кандидат ветеринарных наук, доцент
Новосибирский ГАУ
А. И. ЛЕЛЯК, директор
А. А. ЛЕЛЯК, кандидат биологических наук, заведующая лабораторией
НПФ “Исследовательский центр”
E-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.
Резюме. Исследования проводили с целью сравнительного иузчения влияния препаратов на основе бактерий рода Bacillus – ветом 1.1 (Bacillus subtilis штамм ВКПМ В 10641), ветом 4 (Bacillus amyloliquefaciens штамм ВКПМ В 10643) и ветом 14.1 (Bacillus licheniformis штамм ВКПМ В 10562) – на массу печени лабораторных мышей. Животные получали препараты, предварительно растворенные в дистиллированной воде, в дозах 25, 50, 100 мг/кг живой массы тела ежедневно, в течение 10 суток. Мышам контрольной группы выпаивали дистиллированную воду.
Изучаемые препараты в изучаемых дозах стимулировали достоверное увеличение абсолютной массы печени как в период их введения, так и в течение 20-и суток после отмены и более. Наибольшее ее повышение в пределах физиологической нормы за опытный период отмечали при использовании ветома 1.1 в дозе 100 мг/кг живой массы тела (23,2 г), ветома 4 и ветома 14.1 – в дозе 50 мг/кг (2,1 и 1,94 г соответственно). Влияние доз на абсолютную массу печени в динамике у ветома 1.1 характеризуется прямой зависимостью, ослабевающей к концу эксперимента, у ветома 4 – обратной зависимостью слабой напряженности только при введении препарата, у ветома 14.1 – устойчивой обратной зависимостью, ослабевающей к концу эксперимента.
Ключевые слова: ветом, масса животных, пищеварение, пробиотик, печень, Bacillus licheniformis, Bacillus subtillis.
В последние десятилетия в профилактике заболеваний, стимуляции роста и развития молодняка сельскохозяйственных животных и птиц большое значение приобретают пробиотические препараты [1]. Эти препараты содержат живые микроорганизмы, которые обладают выраженной антагонистической активностью в отношении потенциально патогенной микрофлоры [2]. Значительная часть из них относится к числу таких представителей облигатной микрофлоры, как лактобактерии, стрептококки и бифидобактерии, являющиеся представителями облигатной микрофлоры [3]. Особенно широко сейчас изучают и используют пробиотические препараты на основе бактерий рода Bacillus [4], которые принадлежат к группе транзиторной микрофлоры [5]. Фармакодинамика таких препаратов нуждается в более основательном исследовании ввиду особенностей фармакокинетики транзиторных бактерий [6]. Большой интерес представляет изучение факультативно возникающих симбионтных взаимосвязей в системе бактерия-животное [7].
Цель наших исследований – сравнительное изучение влияния препаратов Ветом 1.1, Ветом 4 и Ветом 14.1 на абсолютную массу печени.
Условия, материалы и методы. Для реализации поставленной цели было сформировано по принципу аналогов девять опытных групп и одна контрольная по 15 мышей в каждой. Мыши I, II и III опытных групп получали ветом 1.1 в дозе 25 мг/кг, 50 мг/кг и 100 мг/кг живой массы тела соответственно; мыши IV – VI – ветом 4; мыши VII – IX – ветом 14.1. Препараты, предварительно растворённые в дистиллированной воде, назначались внутрь, ежедневно, в течение 10 суток, индивидуально каждому животному. Мышам контрольной группы выпаивали дистиллированную воду. Ветом 1.1 в качестве действующего начала содержит рекомбинантный штамм бактерий Bacillus subtillis штамм ВКПМ В 10641, ветом 4 – Bacillus amyloliquefaciens штамм ВКПМ В 10643, ветом 14.1 – Bacillus licheniformis штамм ВКПМ В 10562.
Для изучения влияния препаратов на абсолютный прирост массы печени у мышей в динамике их взвешивание проводили до применения препаратов и на 7-е, 15-е, 30-е и 45-е сутки эксперимента. Статистическая обработка данных производилась на ПЭВМ в приложении Microsoft Office Excel 2007. Достоверность отличий между группами определялось по t-критерию Уэлча, достоверность модифицированного коэффициента корреляции Пирсона определялось через t-критерий Стьюдента.
Результаты и обсуждение. На начало эксперимента абсолютная масса печени у мышей из подопытных групп не имела достоверных различий (табл.).
Таблица. Динамика массы печени подопытных животных, г
Группа |
0 суток | 7 суток | 15 суток | 30 суток | 45 суток | За опытный период | ||||||
M±m | у | M±m | у | M±m | у | M±m | у | M±m | у | M±m | у | |
Контроль | 1,47±0,14 | 0,24 | 1,39±0,08 | 0,14 | 1,58±0,17 | 0,29 | 1,57±0,10 | 0,18 | 1,77±0,08 | 0,15 | 1,56±0,08 | 0,14 |
1-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 1,91±0,24 | 0,42 | 1,73±0,08 | 0,15 | 2,40±0,20 | 0,34 | - | - | 1,88±0,1*** | 0,18 |
2-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 1,77±0,18 | 0,31 | 2,71±0,09** | 0,15 | 2,76±0,07*** | 0,13 | 1,73±0,12 | 0,20 | 2,09±0,06** | 0,10 |
3-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 2,37±0,30* | 0,53 | 2,65±0,28 | 0,48 | 2,91±0,04*** | 0,07 | 2,19±0,08** | 0,14 | 2,32±0,07** | 0,12 |
4-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 2,44±0,09*** | 0,16 | 2,18±0,21 | 0,37 | 2,43±0,74 | 1,29 | 1,56±0,08** | 0,14 | 2,02±0,10** | 0,18 |
5-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 2,43±0,74** | 1,29 | 2,35±0,09 | 0,16 | 2,51±0,09** | 0,16 | 1,70±0,05 | 0,08 | 2,10±0,13*** | 0,23 |
6-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 2,19±0,20** | 0,35 | 1,95±0,25*** | 0,43 | 2,00±0,29 | 0,50 | 1,61±0,15 | 0,26 | 1,85±0,11*** | 0,20 |
7-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 1,87±0,07*** | 0,12 | 2,52±0,49 | 0,85 | 1,73±0,08 | 0,15 | 1,71±0,20 | 0,34 | 1,86±0,15*** | 0,25 |
8-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 2,26±0,25 | 0,43 | 2,40±0,61 | 1,06 | 1,78±0,44 | 0,76 | 1,77±0,09 | 0,15 | 1,94±0,16*** | 0,29 |
9-я опытная | 1,47±0,14 | 0,24 | 2,65±0,32 | 0,56 | 2,04±0,16*** | 0,28 | 1,92±0,07*** | 0,12 | 1,56±0,24 | 0,42 | 1,93±0,12*** | 0,20 |
* - P<0,05; ** - P<0,01; *** - P<0,001.
На 7-е сутки у мышей из III - VII опытных групп она была достоверно выше, чем в контроле, на 70,10 (P<0,05); 75,12 (P<0,001); 74,64 (P<0,01); 57,65 (P<0,01); 34,21 (P<0,001) % соответственно. Коэффициент корреляции влияния доз препарата на абсолютную массу печени у животных, получавших ветом 1.1, ветом 4 и ветом 14.1, были равны 0,56 (P<0,01); - 0,25 (P<0,05) и - 0,63 (P<0,01), что соответствует прямой зависимости средней напряжённости, обратной зависимости слабой и средней напряжённости соответственно.
На 15-е сутки исследования достоверное превосходство над контролем отмечено во II, VI и IX опытных группах: 71,59 (P<0,01); 23,38 (P<0,001) и 29,05 (P<0,001) % соответственно. Коэффициент корреляции влияния дозы на абсолютную массу печени у животных, которым назначали ветом 1.1, был равен 0,18 (P<0,01); ветом 4 - 0,45; и ветом 14.1, были равны; и - 0,23 (P<0,01), что соответствует прямой зависимости слабой и средней напряжённости и обратной зависимости слабой напряжённости соответственно.
На 30-е сутки опыта масса печени у мышей из II, III, V и IX опытных групп оказалась выше, чем у получавших воду, на 76,22 (P<0,001); 85,77 (P<0,001); 60,08 (P<0,001) и 22,71 (P<0,001) % соответственно. Коэффициенты корреляции в вариантах с препаратами ветом 1.1, ветом 4 и ветом 14.1 составляли 0,18 (P<0,01); 0,45 и - 0,04 (P<0,01) соответственно, что соответствует прямой зависимости слабой и средней напряжённости и обратной зависимости слабой напряжённости.
На 45-е сутки эксперимента масса печени у животных IV опытной группы была ниже на 12,03 (P<0,01); а в III - выше на 23,87 (P<0,01), чем у аналогов в контроле. Коэффициент корреляции влияния дозы на абсолютную массу печени у особей, получавших препарат ветом 1.1, бы равен 0,68 (P<0,05); ветом 4 - - 0,11; ветом 14.1 - 0,04, что соответствует прямой зависимости средней напряжённости и обратной зависимости слабой напряжённости соответственно.
За опытный период животные I - IX опытных групп оказалась достоверно выше, чем у аналогов в контроле, на 20,52 (P<0,001); 33,97 (P<0,01); 48,72 (P<0,01); 29,48 (P<0,01); 32,62 (P<0,001); 18,58 (P<0,001); 19,23 (P<0,001); 24,36 (P<0,001) и 23,72 (P<0,001) % соответственно. В целом, наибольший ее рост за период опыта отмечен при использовании ветома 1.1 в дозе 100 мг/кг живой массы тела животного, в вариантах с препаратом ветом 14.1 отмечено менее выраженное влияние на величину этого показателя.
Таким образом, масса печени увеличивалась не только в период введения изучаемых препаратов, но и в течение 20 суток после прекращения их дачи. Характер изменения ее величины в динамике зависел от дозы и препарата.
При использовании ветома 1.1 в дозах 50 и 100 мг/кг абсолютная масса печени повышалась до 30-и суток от начала опыта. В дозе 25 мг/кг ее изменение носило волнообразный характер с двумя подъемами на 7-е и 30-е сутки и снижением на 15-е сутки. Установлена достоверная прямая корреляционная зависимость изучаемого показателя средней напряжённости на 7-е сутки исследований и слабой напряжённости на 15 и 30-е сутки исследования.
У животных, получавших Ветом 4 в дозах от 25 до 100 мг/кг живой массы тела, отмечена волнообразная тенденция изменения массы печени с подъёмами на 7-е и 30-е сутки и снижением массы на 15-е и 45-е сутки опыта. На 7-е сутки эксперимента установлена достоверная обратная корреляционная зависимость слабой напряжённости влияния доз на массу печени, а с 15-х по 45-е сутки исследования у препарата не установлено достоверной корреляции влияния доз на массу печени.
Изменение абсолютной массы печени под влиянием ветома 14.1 находилось в прямой зависимости от дозы. Наибольшее ее увеличение при использовании препарата в дозе 100 мг/кг живой массы тела происходило на 7-е сутки, в дозах 25 и 50 мг/кг живой - до 15-и суток с последующим снижением. Для ветома 14.1 отмечена устойчивая обратная корреляционная зависимость влияния доз на массу печени средней напряжённости на 7-е сутки эксперимента с последующим уменьшением корреляции до слабой напряжённости.
Самый продолжительный период последействия на абсолютную массу печени регистрировали у ветома 1.1. Прямое влияние его на массу печени наблюдалась до 30-х суток эксперимента.
Выводы.
1. Ветом 1.1, ветом 4 и ветом 14.1 в изучаемых дозах стимулировали увеличение абсолютной массы печени как в период их введения, так и в течение 20-и и более суток после отмены.
2. Наибольший рост абсолютной массы печени в пределах физиологической нормы за опытный период отмечали при применении ветома 1.1 в дозе 100 мг/кг живой массы тела, ветома 4 и ветома 14.1 – в дозе 50 мг/кг.
3. Влияние доз на абсолютную массу печени в динамике у ветома 1.1 характеризуется устойчивой прямой зависимостью, ослабевающей к концу эксперимента, у ветома 4 – обратной зависимость слабой напряженности только при введении препарата, у ветома 14.1 – устойчивой обратной зависимостью, ослабевающей к концу эксперимента.
Литература
1. Ноздрин Г. А. Эффективные средства стимуляции роста телят // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Материалы 8-й межгосударственной межвузовскрй научно-практической конференции / Г. А. Ноздрин, А. И. Леляк, СПб, 1997.
2. Ноздрин Г. А. Перспективы применения иммуномодуляторов нуклеиновой природы в ветеринарии // Тез. докл. к 3-ей межвуз. научн.-практ. конф. "Новые фармакологические средства в ветеринарии". С.-Петербург, 1991. с. 31-32.
3. Белявская В. А. Пробиотики из рекомбинантных бацилл – новый класс лечебно-профилактических препаратов и способ доставки лекарственных белков в организм // Сборник трудов сотрудников НИКТИ БАВ. – Бердск. 1996 .
4. Ноздрин Г. А. Прирост живой массы мясных гусей бройлерных индеек и цыплят при скармливании пробиотика ветом 1.1 // Достижения науки и техники АПК / Г. А. Ноздрин, А. И. Шевченко, М.: 2009, № 4, с. 44-45.
5. Ноздрин Г. А. Эффективные средства стимуляции роста телят// Новые фармакологические средства в ветеринарии: Матер. 8-й межгос. межвуз. науч. -практ. конф. / Ноздрин, А. И. Леляк СПб, 1997. с. 42-43.
6. Тараканов Б. В. Механизмы действия пробиотиков на микрофлору пищеварительного тракта и организм животных // Ветеринария. 2000, № 1.
7. Наумкин И. В. Превентивное применение пробиотиков цыплятам // Актуальные вопросы ветеринарии: мат. 2-й науч.-практ. конф. фак. вет. мед. НГАУ. / И. В. Наумкин, И. М. Дмитриева, В. В. Кусмарцева Новосибирск, 1999. с. 34.
THE EFFECT OF PROBIOTIC PREPARATION BASED ON BACTERIA OF THE GENUS BACILLUS ON THE GROWTH RATE OF LIVER
G. A. Nozdrin, Doctor of Veterinary Science, Professor
S. N. Tishkov, Postgraduate
A. G. Nozdrin, Candidate of Veterinary Science, Docent
A. V. Vorontsova, Postgraduate
Novosibirsk SAU, Russian Federation
A. I. Lelyak, Director of SPC "Isslyedovatelysky Center"
A. A. Lelyak, Head of Department SPC "Isslyedovatelysky Center"
Summary. The studies drugs Vetom 1.1, Vetom 4 & Vetom 14.1 increased the growth rate of mice without changing the dynamics of growth in body weight in age aspect. The severity of both depend on the applied drug & the studies doses. The maximum gain of weight of liver was recorded in the application Vetom 1.1 & Vetom 14.1 dose 3.388 gr/lb of body weight of animal. The maximum gain of weight of liver was recorded in the application Veton 4 dose 1.694 gr/lb of body weight of animal.
Key words: Vetom, weight of animal, digestion, probiotic, symbiosis, Bacillus licheniformis, Bacillus subtillis.