Центральная вкладка (pdf)

Оригинал статьи (pdf)

УДК 579.26+632.937
ВЛИЯНИЕ БИОПРЕПАРАТА ФИТОП 8.67 НА ВОЗБУДИТЕЛЯ КОРНЕВОЙ ГНИЛИ ГАЗОННОЙ ТРАВЫ
О.Н УСОВА, аспирант
М.В. ШТЕРНШИС, доктор биологических наук, профессор,
Новосибирский государственный аграрный университет
А.А. ЛЕЛЯК, кандидат биологических наук, заведующая лабораторией
Научно-производственная фирма «Исследовательский центр»
E-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Резюме.
Исследования проводили с целью оценки ингибирующей активности бактериального препарата фитоп 8.67 на основе бактерий Bacillussubtilis и B. amyloliquefaciens в отношении возбудителя корневой гнили газонной травы - Fusarium oxysporum, выделенного из пораженных растений мятлика лугового. Использование фитопа 8.67 с концентрацией суспензии препарата 10⁶ и 10⁷ КОЕ/мл на 7-е сутки обеспечивает уменьшение роста колоний патогена. Ингибирующая активность биопрепарата достигает 20 и 60 % соответственно.
При обработке семян мятлика лугового перед посевом в искусственно зараженную возбудителем болезни почву фитопом 8.67 на 15-е сутки их всхожесть в вариантах с концентрацией суспензии 10⁵, 10⁶ и 10⁷ КОЕ/мл достоверно увеличивается на 13,3 – 22,2 %. Одновременно по мере повышения концетрации биопрепарата увеличивается длина проростков. Наибольшая величина этого показателя отмечена при обработке суспензией с концентрацией микроорганизмов 10⁶ и 10⁷ КОЕ/мл, где она выросла, по сравнению с контролем, на 0,45 и 0,74 см соответственно.
Всхожесть семян во влажной камере повышается (в 2 раза) при концентрации препарата 10⁴ и 10⁵ КОЕ/мл. Дальнейшее ее увеличение обеспечивает лишь незначительный рост величины изучаемого показателя на уровне тенденции. На длину проростков в этом случае препарат практически не влияет.
Препарат фитоп 8.67 можно рассматривать как перспективное средство для биологического контроля фитопатогенного гриба F. oxysporum, вызывающего корневую гниль газонных трав.
Ключевые слова: газон, мятлик луговой, Фитоп 8.67, ингибирующая активность, Fusariumoxysporum, Bacillussubtilis, Bacillusamyloliquefaciens.
Сегодня все большую роль в озеленении городов и приусадебных участков играют газоны. Лимитирующий фактор в поддержании газонов – поражение газонных трав грибными болезнями. Комплексом болезней поражается входящий в состав газона мятлик луговой (PoapratensisL.). Как правило, развитие заболеваний связано с длительным выращиванием травостоев на одном месте и накоплением инфекционного начала на растительных остатках и в почве [1].
Более 80 лет для борьбы с болезнями газонных трав использовали синтетические фунгициды. Однако экологически безопасной альтернативой этим фунгицидам могут служить биологические препараты [2].
Интенсивные исследования по биоконтролю болезней газонов проводились зарубежными учеными в конце 90-х годов ХХ века. Они установили, что использование микроорганизмов, обладающих антагонистическими свойствами по отношению к возбудителям болезней, эффективно. Среди таких микроорганизмов широкое распространение получили бактерии родов Pseudomonas и Bacillus, грибы рода Trichoderma и др. [3,4]. В последние годы в России предложено использование биопрепарата алирин Б на основе Bacillussubtilis [5].
Цель наших исследований – оценить ингибирующую активность бактериального препарата Фитоп 8.67 в отношении возбудителя корневой гнили мятлика лугового.
Условия, объекты и методы. Исследования проводили в лабораторных условиях. В качестве объектов использовали сорт Балин мятлика лугового (PoapratensisL.), чистую культуру гриба FusariumoxysporumSchlecht. Fr. – возбудителя корневой гнили, биологический экспериментальный препарат Фитоп 8.67 (титр 10⁹ КОЕ/мл) на основе споровой биомассы бактерий Bacillussubtilis шт. ВКПМ В-10641, шт. ВКПМВ-10642, B. amyloliquefaciens шт. ВКПМ В-10643, разработанный научно-производственной фирмой «Исследовательский центр».
Оценку биопрепарата на антагонистическую активность проводили на чистой культуре гриба с использованием методики агаровых блоков [6]. Активность препарата учитывали по изменению диаметра колонии гриба в сравнении с контролем. На основании полученных данных определяли ингибирующую активность [7].
Чистую культуру гриба Fusariumoxysporum получили путем посева пораженных частей растений мятлика лугового на питательные среды Чапека и картофельно-глюкозный агар. Видовую принадлежность патогенаустанавливали по классификации, предложенной Е. Б. Нельсоном [8].
Модельный опыт по искусственному заражению почвы проводили в лаборатории кафедры энтомологии и биологической защиты растений НГАУ. В контейнеры со стерильной почвой вносили суспензию Fusariumoxysporum (120 конидий на 1 г почвы) и равномерно распределяли по поверхности почвы семена мятлика лугового, предварительно обработанные препаратом Фитоп 8.67 в концентрации 10⁴, 10⁵, 10⁶, 10⁷ КОЕ/мл. В качестве второго варианта обработанные семена закладывали во влажную камеру (чашки Петри с влажной фильтровальной бумагой). Учитывали всхожесть семян и длину проростков. Все опыты проводили в 4 повторностях.
Статистическую обработку экспериментальных данных проводили методом дисперсионного анализа [9] с использованием пакета программ Snedekor для Windows.
Результаты и обсуждение. Из больных растений мятлика лугового, как основного компонента газонных трав, мы выделили в чистую культуру местный штамм возбудителя корневой гнили - гриб Fusariumoxysporum.
Использование фитопа 8.67 с концентрацией суспензии препарата 10⁶ и 10⁷ КОЕ/мл на 5-е и 7-е обеспечило уменьшение роста колоний патогена. Причем при применении в максимальной из используемых концентраций диаметр колоний уменьшается более, чем в 2 раза (см. рисунок). Ингибирующая активность (ИА, %) биопрепарата Фитоп 8.67 в этих вариантах на 7-е сутки ИА составила около 20 и 60 % соответственно.
 

Диаметр колоний Fusariumoxysporum под влиянием препарата
К – контроль; Ф-1 – фитоп 8.67, 10⁴ КОЕ/мл; Ф-2 – фитоп 8.67, 10⁵ КОЕ/мл; Ф-3 – фитоп 8.67, 10⁶ КОЕ/мл; Ф-4 – фитоп 8.67, 10⁷ КОЕ/мл;
НСР05 на 3-е сутки составляет 0,73, на 5-е – 2,37, на 7-е – 2,68.
При обработке семян мятлика лугового Фитопом 8.67 в опыте с искусственным заражением почвы возбудителем болезни газонной травы на 15-е сутки всхожесть семян в вариантах с концентрацией суспензии 10⁵, 10⁶ и 10⁷ КОЕ/мл достоверно увеличилась на 13,3 – 22,2 % (см. таблицу). При этом длина проростков возрастала по мере повышения концентрации биопрепарата. Наибольшая ее величина отмечена при обработке суспензией с концентрацией микроорганизмов 10⁶ и 10⁷ КОЕ/мл, где длины проростков увеличились на 0,45 и 0,74 см.
Всхожесть семян газонной травы во влажной возрастала при концентрации препарата 10⁴ и 10⁵ КОЕ/мл (в 2 раза). Дальнейшее ее повышение обеспечивало лишь незначительный рост величины этого показателя на уровне тенденции. На длину проростков в этом опыте препарата практически не влиял. Это, на наш взгляд, свидетельствует о том, что в условиях высокой влажности и отсутствия инфекционного фона зависимость эффективности препарата от концентрации изменяется.
Влияние препарата на всхожесть семян и длину проростков при искусственном инфицировании почвы грибом F.oxysporum

Выводы. Ингибирующая активность (до 60%) биологического препарата Фитоп 8.67 на основе бактерий рода Bacillus по отношению к чистой культуре штамма фитопатогенного гриба Fusarium oxysporum, выделенного из биоценоза газонных трав, проявляется при использовании суспензии препарата в концентрациях 10⁶ и 10⁷ КОЕ/мл.
Кроме того, препарат оказывает ростстимулируюшее влияние на растения мятлика лугового. При его использовании на инфекционном фоне и средней влажности увеличивается всхожесть и длина проростков. Наилучший эффект обеспечивают высокие концентрации препарата (10⁶ и 10⁷ КОЕ/мл), в случае обработки которыми всхожесть на 15-е сутки достигает 30,0 – 33,3 %, длина проростков – 2,58 – 2,78 см. При высокой влажности и отсутствии инфекционного фона стимулирующее влияние оказывают более низкие концентрации - 10⁴ и 10⁵ КОЕ/мл.
Биологический препарат Фитоп 8.67 перспективен для биологического контроля фитопатогенного гриба ,F. oxysporum, вызывающего корневую гниль газонных трав, что требует дальнейших исследований в полевых условиях.
Литература.

1. Лаптев А. А. Газоны. – Киев: Наукова думка, 1983. 243 с.
2. Nelson E.B. Biological control of turfgrass diseases // Advances Plant Disease management (eds. Hung – Chang Huang, S.N. Acharya). 2003. Res. Signpost, Kerala India. – P. 19-51.

1. Nelson E. B., Craft C.V. A miniaturizied and rapid bioassay for the selection of soil bacteria suppressive to Pythium blight of turfgrass//Phytopathology. 1992.-V.82.- P.206-210.
2. Lo C.N. Biological control of turf diseases using Trichoderma harzianum// Plant Prot.Bullet.- 1997.- V.39.- P.207-225.
3. Алирин, гамаир, глиокладин// ЗАО Агробиотехнология/

http://selhozservis.ru/index.php?id_menu=43

1. Рудаков О.Л. Микофильные грибы, их биология и практическое значение.- М.: Наука, 1981.- 157 с.
2. Соколова М.В. Хитинолитическая и антигрибная активность трех штаммов бактерии рода Serratia //Современная биотехнология в решении проблем защиты растений. СПб. - 1995. - С.214-224.
3. Nelson E. B. Biological control of turfgrass diseases. // Inform. Bul. Cornell Coop. Extension. – 1992. – V. 220. – P. 1 – 12.
4. Доспехов Б. А. Методика полевого опыта. - М.: Агропромиздат. 1985. 350 с.

THE INFLUENCE OF BIOPREPARATION PHYTOP 8.67 ON CAUSING AGENT OF TURFGRASS ROOT ROT
O.N.USOVA, M.V.SHTERNSHIS, A.A.LELIAK
SUMMARY. Antagonistic activity of biological preparation Phytop 8.67 based on bacteria Bacillus subtilis and B. licheniformis towards Fusarium oxysporum Shclecht. Fr., causing agent of turfgrass root rot, isolated from damaged plants of Poa pratensis L., has been estimated. It was shown that inhibitory (antagonistic) activity of the Phytop 8.67 displayed at the concentrations 10⁶ and 10⁷ CFU/ml. The influence of the preparation on sprouting seeds and shooting length of turfgrass Poa pratensis L. as a basic component has been noticed. At high humidity without infection lesser concentrations of Phytop 8.67 appeared to be more active. The results pointed out that the preparation is promising one for turfgrass protection against root rot.

Key words: turfgrass, Poa pratensis, Phytop 8.67, inhibitory activity, Fusarium oxysporum, Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis.