Министерство сельского хозяйства и продовольствия РФ

НОВОСИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

(НГАУ)

 

 

Печать УТВЕРЖДАЮ
Проректор НГАУ
д.в.н., профессор
Ноздрин Г.А. (подпись)
27 ноября 1997 г.

 

 

О Т Ч Е Т

о научно-исследовательской работе по теме:
“Разработка и изучение нового пробиотика - Ветома 3
и схем его применения для профилактики и лечения
болезней органов пищеварения у молодняка в ранний
постнатальный период жизни”

 

 

Декан факультета
ветеринарной медицины
канд. вет. наук, доцент (подпись) Власов А.П.

Руководитель НИР
доктор вет. наук,
профессор (подпись) Ноздрин Г.А.

И.о. зав. кафедрой
фармакологии, доцент (подпись) Наумкин И.В.

 

Новосибирск 1997

Список исполнителей

 

Проректор по научной работе
зав. кафедрой фармакологии
и общей патологии, доктор
ветеринарных наук, профессор (подпись) Ноздрин Г.А.

Старший преподаватель кафед-
ры фармакологии и общей па-
тологии (подпись) Стацевич Л.Н.
Научный сотрудник Ноздрин А.Г.

Студентка факультета ветеринарной
медицины НГАУ Бабенко Е.Г.

РЕФЕРАТ

 

Отчет 19 стр., 4 табл., 19 источников.

ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА, ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ, ОПТИМАЛЬНАЯ ДОЗА.

Объектом исследования является новый пробиотик широкого фармакологического спектра действия. Применяется для профилактики и лечения болезней органов пищеварения у молодняка.

Цель работы - разработка нового препарата для лечения и профилактики заболеваний органов желудочно-кишечного тракта у молодняка в ранний постнатальный период жизни.

В процессе работы выполнены эксперименты по изучению чувствительности к ветому различных видов животных. Изучено действие препарата при применении в различных дозах и схемах.

В результате исследований установлены оптимальные дозы и схемы применения Ветома 3 для лечения у поросят гастроэнтеритов, стимуляции роста и развития поросят.

 

 

СОДЕРЖАНИЕ

Введение
Выбор направления исследования
Изучение терапевтической эффективности Ветома 3  при гастроэнтеритах у поросят
Список литературы

 

 

ВВЕДЕНИЕ

 

    Опыт эксплуатации свиноводческих комплексов и ферм, особенно работающих на промышленной основе, свидетельствует о высокой заболеваемости и гибели молодняка в первые дни и недели жизни. Связано это, прежде всего с высокой концентрацией животных на ограниченной площади, нарушением технологии кормления и содержания животных, воздействием неблагоприятных факторов внешней Среды и несовершенством естественной защиты новорожденных поросят к их воздействию.

    В последний период значительное количество исследований посвящено изучению устойчивости к заболеваниям поросят в первый период жизни, с учетом состояния их естественной резистентности. Так при низком содержании иммуноглобулинов в сыворотке крови новорожденных отмечается их предрасположенность заболеваниям как незаразной, так вирусной и бактериальной этиологии (19).

    У поросят среди незаразных болезней наиболее широко распространены болезни органов пищеварения. Желудочно-кишечные болезни поросят наносят огромный ущерб, вследствие высокой заболеваемости и падежа (до 100 %), затрат на лечебные мероприятия, снижение продуктивных качеств и племенной ценности животных.

    Хотя изучению данной проблемы посвящено много работ, и для лечения этой группы заболеваний предложено много схем, все же до настоящего времени не удается достигнуть 100% сохранности молодняка (5). Связано это с тем, что заболевания преимущественно имеют сложную этиологию, что создает трудности в диагностике и лечении. Лечение болезней поросят на фоне гипогаммоглобулинемии проблематично в связи с тем, что широко применяемые для этой цели средства (антибиотики, сульфаниламидные препараты) мало эффективны (3).

    Для лечения полиэтиологичных заболеваний необходимы препараты, обладающих комплексным действием.

    В последнее время ученые активно работают по созданию препаратов с многогранным действием и эффективных при заболеваниях вирусной и бактериальной этиологии, а также при смешенных инфекциях.

    У поросят заболевания органов пищеварения преимущественно протекают на фоне пониженной резистентности организма с тяжелым течением и высокой летальностью.

    Проблема иммунной недостаточности у молодняка сельскохозяйственных животных выходит на первое место, особенно на свиноводческих комплексах. В этой связи разработка новых препаратов действующих антимикробно, противовирусно и оказывающих иммуномоделирующий эффект весьма актуальна и необходима. Одним из таких препаратов является Ветом 3.

 

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Ц е л ь и с с л е д о в а н и я - изучение нового пробиотика Ветом 3 предназначенного для профилактики и терапии у поросят болезней органов пищеварения в ранний постнатальный период жизни.

 

З а д а ч и и с с л е д о в а н и я

1. Провести токсико-биологическую оценку препарата.
2. Изучить влияние препарата на уровень неспецифической резистентности организма
3. Определить терапевтическую эффективность препарата при различных заболеваниях органов пищеварения у молодняка.
4. Установить наличие у препарата ростостимулирующего действия.
5. Выяснить наличие у препарата нежелательных побочных эффектов.
6. Установить оптимальные дозы и схемы применения Ветома 3.

ВЫБОР НАПРАВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

    Принято выделять три критических периода у новорожденных поросят с учетом состояния и особенностей реактивности молодняка в постнатальный период, проявляющихся иммунодефицитами.

    Первый период у новорожденных поросят - до приема молозива. В этот период в организме почти отсутствуют иммуноглобулины и мало лейкоцитов. При своевременном поступлении качественного молозива происходит компенсация возрастного иммунодефицита.

    Второй возрастной иммунодефицит наблюдается в (14-21)-дневном возрасте. Принято считать, что 3-х недельный возраст поросенка является наиболее критическим, поскольку, большинство антител, полученных с молозивом, расходуется, а активное продуцирование собственных иммуноглобулинов продолжает оставаться невысоким. Для исключения отрицательных последствий второго периода возрастного иммунодефицита, необходимо использовать биологически активные вещества для стимуляции факторов иммунной защиты животных.

    Третий критический период, сопровождающийся развитием иммунного дефицита, связан с отъемом и сменой типа кормления. Следовательно, зная критические периоды, сопровождающиеся развитием иммунодефицитов, можно их предупредить и не допустить заболевания животных.

    Для профилактики заболеваний новорожденных в критические периоды их жизни следует применять препараты, повышающие иммунологический статус организма. Однако отсутствие высокоэффективных иммуномоделирующих препаратов и четко разработанной системы профилактических мероприятий приводит к массовым заболеваниям животных и их падежу в условиях промышленной технологии до (30-50) % поросят (18).

    В связи с вышеизложенным, возникает проблема поиска препаратов для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний молодняка.

    Для лечения желудочно-кишечных заболеваний поросят было предложено большое количество схем с использованием антибиотиков, сульфаниламидных и нитрофурановых препаратов.

    Эффективность лечебных мероприятий при применении антибиотиков и сульфаниламидных препаратов продолжает оставаться невысокой, а при продолжительном их применении снижается из-за появления устойчивых к их действию штаммов патогенных и условно – патогенных микроорганизмов.

    Большой интерес ученых к биорегуляторам организма объясняется тем, что многие болезни возникают при нарушении в системе ауторегуляции организма. Поэтому возникает необходимость в разработке препаратов способных воздействовать не только на болезнетворные агенты, но и повышающих уровень неспецифической резистентности организма у поросят. Применяя биологически активные вещества, пригодные для иммунокоррекции организма, можно довольно эффективно лечить заболевания, при которых нарушение иммунного статуса является или причиной заболевания или существенным звеном патогенеза. На данном этапе иммуномодуляторы не имеют широкого практического применения в ветеринарии. В связи с тем, что иммунная система организма высокодинамична, многокомпонентна, имеет большое количество прямых и обратных связей, имеются определенные сложности в создании таких препаратов и их применении ввиду того, что один и тот же препарат в зависимости от исходного состояния иммунной системы организма, дозы, кратности введения и ряда других факторов, может вызвать прямо противоположные эффекты (12).

    В образовании иммунного ответа организма велико значение тимуса, который содержит биологически активные вещества, способствующие биосинтезу тимусзависимой популяции лимфоидных клеток и влияющих как на клеточные, так и на гуморальные иммунологические реакции.

    С целью предупреждения и коррекции имумнодефицитных состояний в ветеринарии и медицине широко применялись органопрепараты, приготовленные из тимуса животных (1, 4, 7, 9, 11, 13, 14, 15).

    Демидов С.И. (1991) доказал, что органопрепараты из тимуса способствуют усилению пролиферативной и цитотоксической активности, изменяют, соотношение регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов активизируют нуклеотиды, усиливают процессы репликации, транскрипции генетической информации, изменяют криоцитометрические показатели клеток. При аллергических реакциях замедленного типа выявляется усиление активации препаратами тимуса Т-хелперной и Т-супрессорной субпопуляции лимфоцитов.

    В последние годы накоплены многочисленные сведения о высокой иммуномоделирующей активности экзогенных природных РНК. К препаратам этого класса относят - нуклеинат натрия, полирибонат, поливедрим, дрожжевой аутолизат, очищенные, нативные или деградированные РНК (2, 8, 10, 17).

    Для лечения и профилактики болезней поросят довольно успешно применяют и другие БАВ средства (16).

    Иммуностимуляторы усиливают лейкопоэз и фагоцитоз, биосинтез иммуноглобулинов, интерферона и лизоцима. Они способствуют улучшению обменных процессов в организме, регулируют гомеостаз, стабилизируют клеточные мембраны, обеспечивающие биологические функции клетки. Из этой группы лекарственных веществ особую ценность представляют препараты биологического происхождения. В условиях промышленного производства все чаще возникает проблема смешанных инфекций поросят.

    В этой связи весьма перспективны лекарственные препараты, действующие как против вирусных, так и против бактериальных инфекций, а также обладающих свойством повышать естественную резистентность организма животных.

    В последние годы имеются многочисленные сведения о высокой иммуномоделирующей активности пробиотиков, основу которых составляют безвредные для теплокровных микроорганизмы. К препаратам этого класса относят Споробактерин, Биосан, Бифидумбактерин, Лактобактерин, Колибактерин, Ветом 1.1, Субалин и др. Принцип действия данных препаратов заключается в антагонизме составляющих их основу микробов к условно-патогенной и патогенной микрофлоре. Эти препараты применяют с водой или кормом для лечения и профилактики у животных различных заболеваний органов пищеварения. Попадая в желудочно-кишечный тракт, присутствующие в этих препаратах микроорганизмы размножаются, синтезируют многие биологически активные вещества (органические кислоты, липиды, витамины, антибиотики, иммуномодуляторы и т.п.) и повышают неспецифическую резистентность организма-хозяина.

    Аэробные спорообразующие бактерии из рода Bac. subtilis привлекают внимание исследователей различных направлений. Высокая антагонистическая активность в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, продукция биологически активных веществ, наряду с полной безвредностью, обусловливают перспективность использования этих бактерий в качестве основы для разработки лечебно-профилактических препаратов. Лекарственные средства на основе Bac. subtilis имеют высокую эффективность при заболеваниях бактериальной этиологии.

 

ИЗУЧЕНИЕ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ВЕТОМА 3
ПРИ ГАСТРОЭНТЕРИТАХ У ПОРОСЯТ

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

    Для определения влияния Ветома 3 при лечении поросят с диагнозом гастроэнтерит исследования проводились в АОЗТ “Кудряшовское” Новосибирской области. Опыты проводили на поросятах 20 дневного возраста. По принципу аналогов сформировали 2 опытных и контрольную группы по 5 животных в каждой. Поросята подбирались с учетом возраста, дивой массы, физиологического состояния и признаков заболевания.

Животным 1-й опытной группы назначали Ветом 3 в дозе 50 мг/кг 3 раза в день в течение 5 дней.
Животным 2-й опытной группы назначали Ветом 3 в дозе 50 мг/кг 4 раза в день в течение 5 дней.
Животным контрольной группы препарат не применяли. Лечение проводилось по схеме, традиционно применяемой в хозяйстве.

    Для контроля за состоянием животного ежедневно проводилось их клиническое обследование с обязательной термометрией. У всех животных в начале и в конце опыта проводили морфологические и биохимические исследования крови.

    Результаты исследований были статистически обработаны с использованием программы биометрической обработки “PGN v.1.0” разработанной И.В. Наумкиным и В.В. Гартом (программа утверждена ГУ высших учебных заведений при Государственной Комиссии Совета Министров СССР по продовольствию и закупкам приказом № 091-4 от 15.01.91 г.).

 

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

    Полученные нами данные свидетельствуют о том, что Ветом 3 оказывает терапевтическое действие при гастроэнтеритах у поросят. У подопытных поросят 1-й группы улучшение общего состояния наблюдалось на (2-3) день. Понос прекращался на 3-й день лечения. Температура тела нормализовалась преимущественно на 4-й день лечения (табл. 1). Подопытные поросята в первой группе выздоравливали в среднем на 5 день лечения. После прекращения дачи препарата состояние у поросят удовлетворительное, рецидивов заболевания не регистрировали. Терапевтическая эффективность составляла 100%.

    У поросят 2-й опытной группы улучшение общего состояния регистрировалось у трех животных на 3-й день, 2 поросенка с тяжелой формой течения болезни пало на 2-й день. Температура тела приходила в норму на 4-й день (табл. 1). Продолжительность лечения оставшихся 3 поросят составляла 4 дня.

    Среди поросят контрольной группы снижение явлений дегидратации и интоксикации наблюдали через 4-5 дней, 1 животное пало. Выздоровление наступало в среднем на 6-й день.

 

Температура тела подопытных поросят (t ^ОС)

Таблица 1

Группа	Температура тела животных на
	1-й день	2-й день	3-й день	4-й день	5-й день
Контроль	40,2+0,3	39,5+0,3	39,2+0,3	39,1+0,2	38,9+0,2
1 опытная	40,5+0,4	40,4+0,2	39,9+0,2	39,6+0,3	39,3+0,3
2 опытная	39,9+0,2	39,9+0,3	39,8+0,1	39,6+0,1	39,3+0,2

 

По результатам наших исследований у подопытных животных быстрее нормализовывалось функциональное состояние и прекращался понос. Температура тела приходила в норму несколько позднее. При тяжелом течении заболевания препарат не оказывал терапевтического действия.

У поросят опытных и контрольной групп до введения препарата не отмечали достоверных различий в изучаемых показателей крови (табл. 2, 3). Состав крови указывают на снижение воспаления и улучшение окислительно-восстановительных реакций в организме (табл. 2,3).

Биохимические показатели крови подопытных поросят

Таблица 2

Группа	Содержание кальция, мг %	Содержание фосфора, мг %	Резервная щелочность, мг %	Общий белок, г	Сахар, г
До введения
Контроль	10,3+0,3	6,9+0,3	36,31+1,5	7,5+0,6	27+3
1 опытная	10,3+0,2	6,9+0,2	37,42+0,7	7,5+0,7	25+3
2 опытная	10,2+0,3	6,9+0,3	36,82+0,3	7,1+0,4	24+4
После выздоровления
Контроль	10,2+0,3	6,9+0,4	37,32+0,9	7,8+0,3	29+3
1 опытная	10,4+0,2	6,8+0,5	45,21+0,5	8,3+0,6	28+2
2 опытная	10,3+0,4	7,0+0,1	40,31+0,3	8,1+0,2	26+1

    После выздоровления у подопытных животных отмечали повышение в крови резервной щелочности и общего белка. У животных, которым давали Ветом 3, в дозе 50 мг/кг массы 3 раза в день эти изменения выражены ярче по сравнению с показателями у животных, которые получали препарат по 50 мг/кг массы 4 раза в сутки.

    У поросят 1 и 2 опытных групп, в крови увеличивалось количество эритроцитов соответственно на 8,5 и 15,2%, лейкоцитов - на 7,2 и 8,6%. Таким образом, количество лейкоцитов и эритроцитов в большей степени увеличивалось при применении Ветома 3 четыре раза в сутки по 50 мг/кг массы. Повышение эритроцитов в крови у поросят опытных групп указывает на снижение токсических, воспалительных процессов и улучшение дыхательной и токсико-выделительной функций организма на клеточном уровне.

    Повышение лейкоцитов в крови у подопытных животных указывает на усиление фагоцитарной активности крови.

Морфологические показатели крови подопытных поросят

Таблица 3

Группы	Показатели крови
	Эритроциты, млн	Лейкоциты, тыс.	Гемоглобин, г/ %	СОЭ, мм/час
Перед введением
Контрольная	5,8+0,2	13,8+0,5	11,1+0,3	8,5+0,3
1 опытная	6,1+0,4	14,0+0,7	11,0+0,4	8,4+0,2
2 опытная	5,9+0,3	14,5+0,3	10,9+0,2	8,3+0,1
После выздоровления
Контрольная	5,9+0,4	13,9+0,7	10,8+0,4	8,3+0,2
1 опытная	8,5+0,3	14,9+0,5	10,5+0,3	8,2+0,3
2 опытная	6,8+0,3	15,1+0,4	10,5+0,1	8,1+0,1

Подопытные поросята интенсивнее росли и развивались по сравнению с аналогами из контрольной группы (табл. 4).

Интенсивность роста подопытных поросят

Таблица 4

Группы	Масса до опыта, кг	Масса в конце Опыта, кг	Среднесуточный Прирост, г
Контрольная	2,9+0,7	3,3+0,2	400,0
1 опытная	3,9+0,3	4,1+0,4	450,0
2 опытная	3,1+0,3	3,6+0,3	500,0

Поросята 1-й опытной группы по приросту массы превышали аналогов из контроля на 12,5 %. Среднесуточный прирост у поросят 2-й опытной группы составил 500 г, что на 25 % выше аналогов из контроля.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

    Таким образом, Ветом 3 оказывал лечебное действие при гастроэнтеритах у поросят, но только при легком течении болезни. Под влиянием Ветома у поросят восстанавливаются функции организма, в меньшей степени отмечаются явления интоксикации и гидратации. Продолжительность лечения сокращалась до 4-5 дней. Увеличение в крови подопытных поросят количества эритроцитов указывает на активизацию окислительно-восстановительных процессов. Результаты по изменению содержания в крови лейкоцитов свидетельствуют о повышении фагоцитарной активности, активизации защитных реакций организма. Увеличение общего белка в крови у подопытных поросят указывает на нормализацию физиологического состояния, активизацию внутриклеточного метаболизма. По видимому, повышается уровень неспецифической резистентности. Увеличение щелочного резерва крови свидетельствует о снижении процессов ацидоза и более высоком уровне окислительно-восстановительных процессов в организме. Указанные позитивные изменения, происходящие в организме, обеспечивают более интенсивный рост подопытных поросят. Более выраженные изменения морфологических показателей крови и максимальный среднесуточный прирост регистрировался у поросят, получавших Ветом 3 по 50 мг/кг массы 4 раза в сутки.

    Следовательно, Ветом 3 целесообразнее скармливать поросятам 4 раза в сутки по 50 мг/кг массы. Препарат можно рекомендовать применять как с лечебно-профилактической, так и ростостимулирующей целью.

    Для лечения гастроэнтеритов у поросят целесообразно применять Ветом 3 в дозе 50 мг/кг 3 раза в день до выздоровления и Ветом 4 в дозе 50 мг/кг 4 раза в день до выздоровления.

 

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

 

1. Артемов Б.Т., Ефанова Л.И., Дынин В.И. и др. Влияние препарата тимоген на развитие вакцинного штамма возбудителя рожи свиней в пробирочных опытах // Тез. докл. к 6-й межгосуд. межвуз. научн. -практ. конф. “новые фармакологические средства в ветеринарии” С.-Пб, 1994 - с.71-72.

2. Блинов М.Н., Луганова И.С. Рибонуклеиновые кислоты как модуляторы иммунного ответа // Молекулярные механизмы клеточного гомеостаза. Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1987 - с.182-195.

3. Коваленко Я.Р., Федоров Ю.Н. Роль пассивного иммунитета в специфической профилактике заболеваний сельскохозяйственных животных // Проблемы инфекционной патологии сельскохозяйственных животных М.: Колос, 1979. - с.25-33.

4. Копылова М.Г. Анализ некоторых морфофункциональных показателей состояния тимуса и фабрициевой сумки цыплят-бройлеров после применения тимогена // Тез. докл. к 4-й межгосуд. межвуз. научн.-практ. конф. “Новые фармакологические средства в ветеринарии” С.-Пб, 1992 - с.22.

5. Коробов А.В., Щайхаманов М.Х. Профилактика и лечение желудочно-кишечных заболеваний молодняка свиней в крупных промышленных комплексах // Сб. науч. тр. / Моск. вет. акад. - Т.90 - С.7-10.

7. Кузник Б.И., Будажабон Г.Б., Будажабон Н.Г. и др. Тималин как модулятор иммуногенеза и гемостаза // Фармакология и токсикология - 1984 - №1 - С.67-71.

8. Лапик А.С., Матиенко Н.А. Общее действие и токсичность препаратов рибонуклеиновой кислоты // Фармакология и токсикология. - 1970 - №1 - с.94-95.

9. Никитенко А.М. Новые иммуномоделирующие препараты // Тез. докл. к 3-й межвуз. научн. -практ. конф. “Новые фармакологические препараты в ветеринарии” С-Пб.- 1991. - с.23.

10. Ноздрин Г.А. Перспективы применения иммуномодуляторов нуклеиновой природы в ветеринарии // Тез. докл. к 3-й межвуз. научн. -практ. конф. “Новые фармакологические препараты в ветеринарии” С-Пб.- 1991.- с.31.

11. Ноздрин Г.А., Зеленков В.Н. Новые иммуномодуляторы и лечебно-профилактические средства // Тез. докл. к 4-й межгосуд. межвуз. научн. -практ. конф. “Новые фармакологические препараты в ветеринарии” С-Пб, -1992 - с.25.

12. Ноздрин Г.А., Наумкин И.В. Биологически активные вещества и перспективы их применения в ветеринарии // Лекция Новосибирск, 1992. - 36 С.

13. Приходько Е.И., Придыбайло Н.Д., Хлопина А.Ф., Якушева Л.Н. Иммуномоделирующие свойства тималина в липосомальной форме // Тез. докл. к 5-й межгосуд. межвуз. научн. -практ. конф. “Новые фармакологические средства в ветеринарии” С.-Пб, 1993 - с. 47-48.

14. Соколов В.И. Влияние пентидов тимуса на морфофункциональную активность органов иммуногенеза у птиц // Тез. докл. к 1-й научн.-практ. конф. “Новые фармакологические средства в ветеринарии” Л., 1989- с.122.-123.

15. Соколов В.Д., Локес И.И. Использование разноплановых лекарственных средств при диареях поросят сосунов // Агропромышленному комплексу Полесья УССР - научное обеспечение: Тез. докл. конф.- Житомир, 1989 - С.70-71.

16. Соколов В.Д., Андреева И.А., Соколов А.В. Иммуномодуляторы в ветеринарии // Ветеринария.- 1992. - №7. - с.45.

17. Спиридонов Г.Н. Влияние отдельных иммуномодуляторов на показатели противотуберкулезного иммунитета // Автореф. дис. канд. вет. наук- Казань, 1988.-19 с.

18. Урбан В.П. Теоретические и практические задачи сохранения молодняка в животноводческих комплексах // Вест. с/х науки 1981.- №12.- с.91-100.

19. Чекишев В.М., Пономарев Г.В. Определение уровня иммуноглобулинов у новорожденных животных // Ветеринария - 1976. - № 11. - с.106-107.