Министерство сельского хозяйства и продовольствия РФ

НОВОСИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ  (НГАУ)

УТВЕРЖДАЮ
Проректор НГАУ
д.в.н., профессор
Г. А. Ноздрин
1997 год

О Т Ч Е Т

о научно-исследовательской работе по теме:
“Разработка и изучение нового пробиотика - Ветома 3
и схем его применения для профилактики и лечения
болезней органов пищеварения у молодняка в ранний
постнатальный период жизни”

Новосибирск 1997

Список исполнителей

РЕФЕРАТ

Отчет _ стр., _ табл., 26 источников.

ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА, ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ, ОПТИМАЛЬНАЯ ДОЗА.

    Объектом исследования является новый пробиотик широкого фармакологического спектра действия. Применяется для профилактики и лечения болезней органов пищеварения у молодняка.

    Цель работы - разработка нового препарата для лечения и профилактики заболеваний органов желудочно-кишечного тракта у молодняка в ранний постнатальный период жизни.

    В процессе работы выполнены эксперименты по изучению чувствительности к Ветому различных видов животных. Изучено действие препарата при применении в различных дозах и схемах.

    В результате исследований установлены оптимальные дозы и схемы применения Ветома 3 при ряде болезней органов пищеварения и с профилактической целью. Изучена терапевтическая эффективность воздействие препарата при различных заболеваниях органов пищеварения.

СОДЕРЖАНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ

сокращений, условных обозначений, единиц и терминов

1. аЕ-РОК - посттимические предшественники функционально зрелых лимфоцитов.
2. тЕ-РОК - общие Т-лимфоциты.
3. рЕ-РОК - Т-индукторы-хелперы.
4. вЕ-РОК - Т-киллер-супрессоры.
5. бЕ-РОК - активность Т-лимфоцитов.

ВВЕДЕНИЕ

    Незаразные болезни молодняка сельскохозяйственных животных в первые дни жизни широко распространены в животноводстве и являются одной из основных проблем ветеринарной практики. По мнению Тарасова И.И. болезни молодняка сельскохозяйственных животных имеют повсеместное распространение и их лечение, и профилактика являются неотложными задачами ветеринарии.

    Из незаразных заболеваний молодняка наиболее часто регистрируют желудочно-кишечные болезни, которые составляют у молодняка до 10-дневного возраста (60-90)%. Связано это, прежде всего, с нарушением технологии содержания и кормления животных, а также несовершенством естественной защиты их организма относительно воздействия неблагоприятных факторов внешней среды. Желудочно-кишечные болезни телят наносят огромный ущерб животноводству вследствие высокой заболеваемости и падежа (до 100 %), затрат на лечебные мероприятия, снижения продуктивных качеств и племенной ценности животных. Хотя изучение данной проблемы посвящено много работ, и для лечения этой группы заболеваний предложено много схем, все же до настоящего времени не удается достигнуть 100 % сохранности молодняка. Гительсон С.С. (1974), Ежиков А.А. (1970), Зароза  В.Г. (1984) и др. установили, что наибольшее распространение среди болезней телят имеет диспепсия, заболеваемость которой на молочных фермах и комплексах составляет (80-95)%, а летальность от 15% до 70 %. Причем, заболевание имеет сложную этиологию, что создает трудности в диагностике и лечении. Ученые и практики продолжают поиск комплексных средств и разработку схем лечения, способных повысить эффективность ветеринарных мероприятий. При заболеваниях в ранний период жизни регистрируется высокая летальность в связи с тем, что болезни чаще протекают на фоне иммунодефицитов.

    Проблема иммунной недостаточности у молодняка сельскохозяйственных животных выходит на первое место, особенно при переводе хозяйств на промышленную основу и создания комплексов с концентрацией большого поголовья животных на большой территории. Это способствует тому, что у животных создается недостаточный иммунный фон и возможно снижение напряженности иммунитета. Болезни органов пищеварения у молодняка, как правило, протекают на фоне пониженной резистентности организма. Поэтому разработка новых препаратов и схем лечения у молодняка желудочно-кишечных заболеваний, а также обеспечивающих повышение неспецифической резистентности является перспективным направлением.

    В связи с вышеизложенным, проблема поиска новых препаратов для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний молодняка является актуальной в настоящее время.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Ц е л ь и с с л е д о в а н и я - разработка и изучение нового пробиотика для профилактики и терапии у молодняка болезней органов пищеварения в ранний постнатальный период жизни.

З а д а ч и и с с л е д о в а н и я

1. Провести токсико-биологическую оценку препарата.
2. Изучить влияние препарата на уровень неспецифической резистентности организма.
3. Определить терапевтическую эффективность препарата при различных заболеваниях органов пищеварения у молодняка.
4. Установить наличие у препарата ростостимулирующего действия.
5. Выяснить наличие у препарата нежелательных побочных эффектов.
6. Установить оптимальные дозы и схемы применения Ветома 4.

1. ВЫБОР НАПРАВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

    В животноводстве для профилактики и лечения различных болезней используется большое количество различных лекарственных средств. В последнее десятилетие довольно широко применяются лекарственные вещества, которые при введении в организм повышают общий биотонус с преимущественной стимуляцией функциональной деятельности той или иной системы в пределах физиологических возможностей организма. Препараты, обладающие подобным действием, объединяют под общим названием “биологически активные вещества”. Биологически активные препараты представляют собой неспецифические средства, которые обладают свойством активизировать внутриклеточный метаболизм, обмен веществ, повышать неспецифическую резистентность организма животных, стимулировать рост, развитие животных и повышать их продуктивность.

    Для лечения желудочно-кишечных болезней телят предложено большое количество схем с использованием антибиотиков, сульфаниламидных, нитрофурановых и препаратов других лекарственных групп (1, 2, 4, 13, 20, 23). Применение антибиотиков и сульфамидных препаратов позволяло добиваться выздоровления до 95,4% заболевших телят. Однако продолжительное и не всегда научно обоснованное и правильное применение антибиотиков и сульфаниламидных препаратов привело к резкому снижению их терапевтической эффективности из-за появления устойчивых к их действию штаммов микроорганизмов. Понижению эффективности действия препаратов способствовало и то, что в последнее десятилетие большинство заболеваний протекало на фоне иммунодефицитов. В этой связи возникает необходимость широкого применения препаратов способных воздействовать не только на болезнетворные агенты, но и повышающих уровень неспецифической резистентности новорожденных телят.

    Нормальная жизнедеятельность живых организмов невозможна без развитой системы регуляции и координации их жизненных функций. Такую регуляцию осуществляют биорегуляторы, которые оказывают влияние на состояние естественной резистентности организма и уровень устойчивости его к неблагоприятным факторам внешней среды (15).

    Большой интерес ученых к биорегуляторам организма объясняется тем, что многие болезни возникают при нарушении в системе ауторегуляции организма. Применяя биологически активные вещества, пригодные для иммунокоррекции организма можно довольно эффективно лечить заболевания, при которых нарушение иммунного статуса является или причиной заболевания или существенным звеном патогенеза (10, 16, 19, 21, 25).

    Однако имеются определенные проблемы в применении иммунотропных препаратов т.к. иммунная система организма является высоко динамичной, многокомпонентной, с большим количеством прямых и обратных связей.

    Кроме того, имеются определенные сложности в создании препаратов и разработки схем их применения ввиду того, что один и тот же препарат, в зависимости от исходного состояния иммунной системы организма, дозы, кратности введения и ряда других факторов, может вызывать прямо противоположные эффекты (16). Целесообразность их применения в животноводстве, подтверждается еще и тем, что они активизируют анаболические процессы в организме и проявляют ростостимулирующий эффект (22).

    В образовании иммунного ответа организма велико значение тимуса, который содержит биологически активные вещества, способствующие биосинтезу тимусзависимой популяции лимфоидных клеток и влияющие как на клеточные, так и на гуморальные иммунологические реакции. В этой связи для предупреждения и коррекции иммунодефицитных состояний широко применяются препараты, приготовленные из тимуса животных (3, 5, 6, 7). Демидов С.И. (1991) доказал, что препараты из тимуса способствуют усилению пролиферативной и цитотоксической активности, изменяют соотношение регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов, активизируют иммунокомпетентные клетки, усиливают процессы репликации, транскрипции генетической информации, изменяют криоцитометрические показатели клеток. При аллергических реакциях замедленного типа выявляется усиление активации препаратами тимуса Т-хелперной и Т-супрессороной субпопуляции лимфоцитов.

    Иммуностимуляторы усиливают лейкопоэз и фагоцитоз, биосинтез иммуноглобулинов, интерферона и лизоцима. Они способствуют улучшению обменных процессов в организме, регулируют гомеостаз, стабилизируют клеточные мембраны, обеспечивающие биологические функции клетки (18).

    Для коррекции иммунодефицитных состояний молодняка в ветеринарии широко применяют полирибонуклеотиды (8, 9, 11, 12, 17). К препаратам этой группы относятся нуклеинат натрия, полирибонат, поливедрим и др.

    В последние годы имеются многочисленные сведения о высокой иммуномодулирующей активности пробиотиков, основу которых составляют безвредные для теплокровных микроорганизмы (29). К препаратам этого класса относят Споробактерин, Биосан, Бифидумбактерин, Лактобактерин, Колибактерин, Ветом 1.1, Субалин и др. Принцип действия данных препаратов заключается в антагонизме составляющих их основу микробов к условно-патогенной и патогенной микрофлоре. Эти препараты применяют с водой или кормом для лечения и профилактики у животных различных заболеваний органов пищеварения. Попадая в желудочно-кишечный тракт, присутствующие в этих препаратах микроорганизмы размножаются, синтезируют многие биологически активные вещества (органические кислоты, липиды, витамины, антибиотики, иммуномодуляторы и т.п.) и повышают неспецифическую резистентность организма-хозяина.

    Аэробные спорообразующие бактерии из рода Bac. subtilis привлекают внимание исследователей различных направлений. Высокая антагонистическая активность в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, продукция биологически активных веществ, наряду с полной безвредностью, обусловливают перспективность использования этих бактерий в качестве основы для разработки лечебно-профилактических препаратов. Лекарственные средства на основе Bac. subtilis имеют высокую эффективность при заболеваниях бактериальной этиологии. По данным Поспеловой В.В. (1994), совместное культивирование ацидофильной палочки бифидобактериями физиологически совместимо и обеспечивает сохранение, свойственное для каждого из этих штаммов бактерий, роста биомассы без угнетающего воздействия дополнительного микробного компонента. В результате проведенных испытаний было установлено положительное влияние бифидобактерий и ацидофильной палочки на рост и развитие телят (1, 5, 8, 30). По этому принципу сконструирован препарат Ветом 3.

 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ВЕТОМА 3 ПРИ ДИСПЕПСИИ У ТЕЛЯТ

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

    Терапевтическая эффективность Ветома 3 при лечении у телят диспепсии изучалась в АОЗТ “Морское” Новосибирской области. Опыты проводили на телятах черно-пестрой породы в возрасте от 2 до 10 дней. Животных в подопытные группы подбирали по принципу аналогов с учетом возраста, массы, тяжести течения заболевания и физиологического состояния. Было сформировано 3 опытных и контрольная группы по 5 телят в каждой группе. Животных контрольной (1-й) группы лечили по схеме, традиционно применяемой в хозяйстве, с применением препарата Стартин 4, антибиотиков (левомицетин, стрептомицин), плазмозаменяющих и регидратационных средств. В схему лечения животных опытных групп включили ветом 3 с кормом. В 1-й опытной группе Ветом 3 применяли в дозе 50 мг/кг живой массы 4 раза в день через 6 часов. Во 2-й опытной группе Ветом 3 применяли в дозе 50 мг/кг живой массы 3 раза в день через 8 часов. В 3-й опытной группе Ветом 3 применяли в дозе 50 мг/кг живой массы 2 раза в день через 12 часов. Для контроля за состоянием животных ежедневно проводилось клиническое исследование. Учитывали особенности течения заболевания. После выздоровления в течение месяца велось наблюдение за ростом и развитием животных. Кровь у подопытных телят исследовали до применения препарата, и после выздоровления. В крови определяли количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобин, цветной показатель, СОЭ, щелочной резерв, общий белок, a - глобулины, b - глобулины, g - глобулины бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови, фагоцитарную активность нейтрофилов, фагоцитарный индекс и фагоцитарное число.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

    При обследовании выявлена следующая клиническая картина: животные угнетены картина: животные угнетены, вялые, аппетит ослаблен, иногда отсутствует. Заболевшие телята подолгу лежат. При аускультации брюшной полости прослушиваются звуки урчания или переливания жидкости в кишечнике. У некоторых телят обнаруживаются боли на почве спазма кишечника. При этом теленок вздрагивает, беспокоится, обнюхивает живот, ударяет тазовыми конечностями в сторону живота, иногда издает стоны. Шерсть в области ануса, промежности и хвоста запачкана жидкими каловыми массами. Кал жидкий, бежевого цвета. Частота дефекаций от 5 до 7 раз в сутки. Видимые слизистые оболочки бледно-матового цвета.

    У животных перед применением Ветома 3 заболевание протекало в легкой форме. Животные были угнетены, аппетит понижен, перистальтика кишечника усилена, кал жидкий, бежевого цвета. Шерсть в области ануса, промежности и хвоста запачкана жидкими каловыми массами. Температура тела от 39,0 до 40,1 ° C, частота пульса от 85 до 95 и дыхания от 28 - 32.

    При лечении препаратом Ветом 3 дополнительно с отварами трав (кровохлебка, кора дуба) были получены следующие результаты.

    В 1-й опытной группе у 2-х телят на 3-й день лечения и у 3-х на 4-й день лечения отмечено улучшение общего состояния - аппетит нормализовался, кал приобрёл более густую консистенцию, частота дефекаций снизилась до 4 раз в сутки. Животные выздоровели на 5-й день лечения.

    Во 2-й опытной группе у всех телят на 4-й день лечения отмечено небольшое улучшение состояния. Аппетит нормализовался, кал стал более густым, частота дефекаций составила 5 раз в сутки. Животные выздоровели на 6-й день лечения.

    В 3-й опытной группе у 5-ти телят на 6-й день лечения наблюдалось незначительное улучшение состояния. Кал имел кашицеобразную консистенцию, улучшился аппетит.

    В контрольной группе у 4-х телят на 3 день лечения и у 2-х на 4-й день наблюдается более активный аппетит, кал приобрел нормальную консистенцию, частота дефекаций составила 4 раза в сутки, выздоровление наступило на 6-й день.

    При исследовании крови у телят после выздоровления во всех группах отмечались изменения биохимических и морфологических показателей крови. В опытных группах эти изменения наиболее ярко выражены. Так, количество эритроцитов после введения препарата увеличилось в контрольной группе на 12,4 %, в 1-й, 2-й и 3-й опытных, соответственно, на 19,4 %, 13,6 %, 2,5 %. Количество лейкоцитов в контрольной группе увеличилось на 1 %, в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах, соответственно, на 4,9 %, 2,9 %, 7,3 %. Гемоглобин в контрольной группе увеличился на 38,3 %, в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах, соответственно, на 37,5 %, 4,9 %, 8,7 %. Цветной показатель снизился в контрольной группе на 5,43 %, в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах, соответственно, на 1,15 %, 5,46 %, 3,3 %. СОЭ снизилась в 1-й опытной группе на 20 %, в других группах этот показатель остался без изменений. Щелочной резерв увеличился в контрольной группе, 1-й, 2-й и 3-й опытных группах, соответственно, на 7,2 %, 3,23 %, 0,81 %, 0,99 %. Показатель общего белка снизился во всех группах, соответственно, на 16,4 %, 2,49 %, 24,6 %, 9,4 %. Количество альбуминов увеличилось по группам, соответственно, на 9,72 %, 7,71 %, 2,88 %, 12,09%. Количество a -глобулинов снизилось во всех группах, соответственно, на 20,98 %, 12,32 %, 12,65 %, 19,97 %. Количество b -глобулинов снизилось во всех группах, соответственно, на 28,1 %, 9,83 %, 23,29 %, 24,09 %. Количество g -глобулинов увеличилось в контрольной группе на 1,6 %, в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах, соответственно, на 3,94 %, 5,35 %, 1,90 %. Лизоцимная активность сыворотки крови увеличилась в контрольной группе на 51,26 %, в 1-й, 2-й и 3-й опытной группах соответственно на 43,41 %, 58,12 %, 58,12 %. Бактерицидная активность сыворотки крови увеличилась в контрольной группе на 4,08 %, в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах соответственно на 7,58 %, 4,72 %, 0,2 %. Кроме того, во время опыта был проведен учет показателей массы телят до и после применения Ветома 3, а также через месяц после введения препарата.

    Из анализа крови животных видно, что после лечения количество, в среднем, эритроцитов увеличилось на 0,13х10¹²/л, гемоглобин увеличился на 0,45 г/%, цветной показатель снизился на 0,01. Количество лейкоцитов увеличилось на 0,34х10⁹/л, СОЭ снизилась на 0,36 мм. Такие показатели могут указывать на нормализацию функций организма - повышение фагоцитарной активности, улучшение дыхательной функции крови и повышение резистентности организма.

Морфологические показатели крови телят опытных групп

Таблица

Биохимические и иммунологические показатели крови телят опытных групп

Таблица

    Живая масса телят контрольной группы составила: до лечения (22,2+0,5) кг, после – (23,5+0,5) кг. В месячном возрасте – (26,3+0,8) кг. Среднесуточный прирост составил 140 гр.

    Живая масса телят 2-й группы (с наиболее успешными результатами) до лечения составила (22,3+0,5) кг, после лечения – (24,0+0,5) кг, в месячном возрасте – (29,1+0,5) кг. Среднесуточный прирост составил 230 гр.

    Телята опытных групп превышают по среднесуточному приросту аналогов из контрольной группы.

Влияние Ветома 3 на интенсивность роста телят

Таблица 2

    Статистически из 100% телят возраста до 15 дней, заболело 41 %, 1 % – падеж. Из 41 % телят заболевших выздоровело 37,5 %.

    В период повторного массового заболевания гастроэнтеритом телят равных по возрасту с телятами опытных групп, подопытные животные не заболели и стали более устойчивы к другим заболеваниям.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

    Выраженный терапевтический эффект при лечении телят с синдромом диареи находится в прямой зависимости от кратности введения Ветома 3.

    Оптимальный терапевтический эффект получен при применении препарата 4 раза в день через 6 часов.

    Ветом 3 оказывает стимулирующее влияние на гуморальные факторы иммунитета.

    При лечении телят с синдромом диареи Ветом 3 следует, применялись в сочетанном с настоями из растений, обладающих вяжущими и противовоспалительными свойствами.

    Для лечения телят с синдромом диареи Ветом 3 следует назначать 4 раза в день до выздоровления. В качестве растворителя рекомендуем использовать настои из растений с вяжущими и противовоспалительными свойствами.

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ВЕТОМА 3 ПРИ ЛЕЧЕНИИ У ТЕЛЯТ ГАСТРОЭНТЕРИТОВ

    Для определения влияния Ветома 3 на процесс лечения гастроэнтеритов у телят исследования проводились в АОЗТ “Пригородное” Новосибирской области. Было сформировано 2 опытных и 1 контрольную группы из телят в возрасте 1 месяц черно-пестрой породы, по 5 голов в каждой. Животным 1-й опытной группы вводили Ветом 3 внутрь в дозе 50 мг/кг 3 раза в день. Животным 2-й опытной группы вводили Ветом 3 внутрь в дозе 50 мг/кг 4 раза в день. Животным контрольной группы указанные препараты не применяли, для лечения использовали Биовит.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

    Среди животных, участвующих в опыте падежа не зарегистрировано.

    У животных 1-й опытной группы заболевание протекало в легкой форме, они выздоровели в среднем на 5-6 день.

    Животные 2-й опытной группы переболели в легкой форме, но их выздоровление наступило быстрее - на 4-5 день.

    В контрольной группе заболевание протекало преимущественно со средней степенью тяжести, и выздоровление наступило в среднем на 9-10 день.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

    Ветом 3 является эффективным и недорогим препаратом при лечении у телят гастроэнтеритов. Оптимальный режим применения препарата - 4 раза в день в дозе 50 мг/кг.