Посмотреть (скачать) в формате PDF
Мифтахутдинов Алевтин Викторович
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
И ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА ЗИМУН 4.24
ПРИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ
БРОНХОПНЕВМОНИИ ТЕЛЯТ
16.00.04 - Ветеринарная фармакология с токсикологией
Автореферат диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Троицк - 2005
Работа выполнена в ФГОУ ВПО ≪Уральская государственная
академия ветеринарной медицины≫.
Научный руководитель: доктор ветеринарных наук
Самородова Инна Моисеевна
Официальные оппоненты: доктор биологических наук,
профессор
Сунагатуллин Фарук Ахмадулович
Ведущая организация:
доктор ветеринарных наук,
профессор
Ноздрин Григорий Антонович
ФГОУ ВПО ≪Уральская
государственная
сельскохозяйственная академия≫
Защита состоится 2005г. в 1330 часов на
заседании диссертационного совета Д 220.066.01 в ФГОУ ВПО
≪Уральская государственная академия ветеринарной медицины≫.
Адрес: 457100, Челябинская область, г. Троицк, ул. Гагарина, 13,
тел. 2-19-89.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО
≪Уральская государственная академия ветеринарной медицины≫.
Автореферат разослан 2005г.
Ученый секретарь
диссертационного совета Прокофьева Т.В.
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. По данным официальной статистики из всех бо-
лезней крупного рогатого скота 97% составляют незаразные заболевания,
которые вызываются главным образом условно патогенной микрофлорой.
Наибольший удельный вес из них занимают болезни органов пищеваре-
ния и органов дыхания (В. Д. Баранников и др., 1997; В.В. Шитиков, 2001;
А.Г. Шахов, 2002 и др.).
Длительное неконтролируемое применение антибиотиков для подав-
ления патогенной и условнопатогенной микрофлоры при лечении болез-
ней незаразной этиологии ещё более усугубило проблему, приведя к обра-
зованию лекарственной устойчивости бактерий (В.В. Смирнов, 1998 и др.;
Г.А. Ноздрин, А.И. Леляк, 1999). Именно это и наблюдается в большинст-
ве хозяйств нашего региона, где и без этого в связи с неблагоприятной
экологической обстановкой отмечается низкий уровень естественной ре-
зистентности молодняка.
Поэтому большой теоретический и практический интерес представляет
поиск лекарственных препаратов обладающих высокой эффективностью,
свойствами повышать гуморальный и клеточный иммунитет, при этом не
обладающих отрицательными последствиями. Всем этим требованиям
отвечают пробиотические препараты.
Важным механизмом в антимикробном действии пробиотиков на ос-
нове Bacillus Subtilis является высокая конкурентоспособность бациллы за
факторы питания, рецепторы связывания и образование бактериоцинов и
антибиотикоподобных веществ. У бактериоцинов, в отличие от антибио-
тиков, установлена высокая избирательность действия в отношении пато-
генной и условно патогенной микрофлоры и синергидные взаимоотноше-
ния с нормофлорой. Bacillus Subtilis препятствует адгезии патогенных
бактерий на рецепторы клеток эпителия слизистой оболочки, также син-
тезирует протеазы, лизирующие бактериальные токсины, лизоцим и орга-
нические кислоты, проявляющие антагонистическую активность в отно-
шении патогенной и условно-патогенной микрофлоры. Разрушаясь, бак-
терии служат источником антигенов для поддержания нормального уров-
ня антител (В.В. Смирнов и др. 1982; В.И. Никитенко и др., 2000; Г.А.
Ноздрин и др. 2003).
Механизм действия пробиотиков неразрывно связан с транслокацией
бактерий из пищеварительного тракта во внутреннюю среду организма и
является естественным защитным механизмом даже более древним, чем
клеточные системы иммунитета, так как имеется не только у теплокров-
ных животных, но и у насекомых и растений (В.И. Никитенко, 1986). Жи-
вые бактерии сенной палочки, примерно 1 из 1000, при введении их в же-
лудок проникают в кровь, лимфу, накапливаются в селезенке, лимфатиче-
ских узлах, печени, в области очагов воспаления или других повреждений
и через несколько часов происходит полное исчезновение жизнеспособ-
ных бактерий из кровотока (R.D.Berg, 1985; L. de Souza et al., 1996; Г.А.
Ноздрин с соавт., 1997; В.И.Никитенко и др., 2001 и др.).
Парентеральное введение препаратов на основе генетически модифи-
цированных штаммов Bacillus Subtilis может разрешить указанные про-
блемы.
Цель и задачи исследования. Целью работы является оценка безо-
пасности препарата Зимун 4.24 при парентеральном применении для теп-
локровных животных и определение оптимальных доз и способов введе-
ния при лечении и профилактике неспецифической бронхопневмонии те-
лят в сравнительном аспекте с антибиотикотерапией.
Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:
1.Дать токсикологическую характеристику Зимуна - 4.24 при различ-
ных способах введения в организм лабораторных животных.
2. Выявить наиболее эффективные способы введения и терапевтические
дозы Зимуна 4.24 при лечении неспецифической бронхопневмонии
телят.
3.Сравнить эффективность антибиотикотерапии и лечения Зимуном
4.24 при неспецифической бронхопневмонии телят.
4. Изучить динамику изменений морфо-биохимических показателей
крови, факторы естественной резистентности и показатели продук-
тивности телят до и после лечения.
5.Исследовать профилактическую эффективность Зимуна 4.24 при рес-
пираторных болезней телят.
6. Рассчитать экономическую эффективность лечебных и профилакти-
ческих мероприятий.
Научная новизна. Проведено комплексное изучение нового препарата
Зимун 4.24, включающее определение, острой и хронической токсично-
сти, мутагенных, эмбриотоксических свойств. Дано обоснование паренте-
рального применения препарата на основе живых бацилл для лечения и
профилактики респираторных заболеваний телят с указанием оптималь-
ных доз, кратности, способа введения в сочетании с симптоматическим
лечением. Проведена сравнительная эффективность Зимуна 4.24 и анти-
биотика ципрофлоксацина в сочетании с симптоматическим лечением при
неспецифической бронхопневмонии телят. Изучены изменения морфо-
биохимических показателей крови, факторов естественной резистентно-
сти и продуктивности телят до и после терапии. Исследована профилак-
тическая эффективность Зимуна 4.24.
Практическая значимость работы. Обоснование возможности па-
рентерального применения препаратов на основе генетически модифици-
рованных штаммов Bacillus Subtilis (в частности Зимуна - 4.24) открывает
возможности для профилактики и лечения болезней различной этиологии.
Разработана методика лечения телят с использованием Зимуна 4.24 и
симптоматической терапии, позволяющая повысить эффективность тера-
пии при бронхопневмонии, интенсивность роста и неспецифическую ре-
зистентность организма телят. Материалы работы могут быть использо-
ваны при чтении лекций по курсам фармакологии, токсикологии и тера-
пии для студентов ветеринарных факультетов, а также написании учебни-
ков и монографий.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Токсикологическая характеристика препарата Зимун 4.24.
2. Выбор оптимальных доз и способов введения Зимуна 4.24 при лече-
нии неспецифической бронхопневмонии телят.
3.Сравнительный анализ эффективности лечебных мероприятий при
бронхопневмонии телят с использованием ципрофлоксацина и Зиму-
на 4.24.
4. Эффективность профилактических мероприятий с использованием
Зимуна 4.24.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на
VII и VIII межрегиональной научно - практической конференции ≪Пер-
спективные направления научных исследований молодых учёных и спе-
циалистов Урала и Сибири≫ (Троицк - 2003, 2004), на межкафедральном
совещании УГАВМ.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 работ.
Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора
литературы, собственных исследований, выводов, практических предло-
жений, списка использованной литературы, который включает 205 источ-
ников, в том числе 43 на иностранном языке, приложения. Работа изло-
жена на 173 страницах машинописного текста, иллюстрирована 29 табли-
цами и 17 рисунками.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал и методы исследований
Научно-исследовательская работа выполнена в период 2002-2004 г.г. в
колхозе ≪Карсы≫ Троицкого района Челябинской области, на базе кафедр
фармакологии и токсикологии, микробиологии и вирусологии, патологи-
ческой анатомии ФГОУ ВПО ≪Уральская государственная академия вете-
ринарной медицины≫, межкафедральной лаборатории УГАВМ, Троицкой
ветеринарной бактериологической лаборатории.
В соответствии с поставленными задачами материалом для исследо-
ваний служили испытуемый препарат, здоровые и больных острой фор-
мой катаральной бронхопневмонии телята, нелинейные интактные клини-
чески здоровые белые мыши, кролики породы шиншилла и беспородные
кошки, кровь, внутренние органы и эмбрионы белых мышей.
При выполнении экспериментальной части работы использованы кли-
нические, фармакологические, токсикологические, микробиологические,
вирусологические, патологоанатомические, гистологические методы ис-
следований.
Во всех экспериментах по определению токсических свойств Зимуна
4.24, где в качестве объекта исследований использовались интактные бе-
лые мыши, придерживались общей схемы деления на опытные и кон-
трольные группы, в соответствие со способом введения препарата. Мы-
шам 1,2 и 3 опытных групп вводили Зимун 4.24 соответственно внутри-
венно, внутримышечно и внутрь. Мышам 4,5 и 6 контрольных групп вво-
дили аналогичное количество изотонического раствора натрия хлорида
соответственно внутривенно, внутримышечно и внутрь. Применение
данной схемы обеспечивает полную тождественность условий выполне-
ния опыта.
Исследование токсичности при нанесении на кожу и слизистые обо-
лочки проводили на 5 кроликах породы шиншилла и 3-х беспородных
кошках по общепринятой методике.
Острую токсичность определяли сначала при однократном, а потом
при четырёхкратном введении с интервалом 6 часов в течение суток в
максимальных дозах для каждого из способов применения. Мышам опыт-
ных групп внутривенно вводили 0,5 мл, внутримышечно 0,7 мл, внутрь
1,0 мл Зимуна 4.24. Мышам контрольных групп вводили аналогичное ко-
личество изотонического раствора натрия хлорида.
Влияние препарата при длительном воздействии изучали в опытах на
78 нелинейных белых мышах обоего пола живой массой 18,9-22,5 грамма.
Животных разделили по принципу аналогов на 6 групп по 13 животных в
каждой. Введение осуществляли один раз в сутки в течение 30 суток в
следующих дозах: внутривенно 0,1 мл, внутримышечно 0,2 мл, внутрь 0,5
мл. Выбор данных доз обусловлен тем, что они являются максимальными
дозировками, не вызывающими повреждающего действия при длитель-
ном введении мышам физиологического раствора и превышают терапев-
тические приблизительно в 150 раз.
Определение массы тела проводили у всех животных до начала опыта
и по его окончании с помощью торзионных весов. На 28 сутки от начала
эксперимента на 3 мышах из каждой группы проводили тиопенталовую
пробу. Для определения мышечной работоспособности на 29 сутки экс-
перимента на 3 мышах из каждой группы проводили пробу с плаванием
по М.Л. Рыловой. В последние сутки опыта у 4-х животных из каждой
группы брали кровь, отрезая кончик хвоста, и готовили мазки для подсчё-
та лейкоцитарной формулы. По 7 животных из каждой группы умерщвля-
ли неполной декапитацией. Осуществляли взятие крови, патологоанато-
мическое вскрытие, гистологические исследования почек, печени, сердца,
лёгких и селезёнки; определяли относительную массу печени, сердца, по-
чек и селезёнки.
Опыт по определению эмбриотоксических и тератогенных свойств
препарата проводили на 30 беременных самках мышей по схеме анало-
гичной предыдущему эксперименту. Убой самок осуществляли на 18
сутки беременности. Показатели гибели эмбрионов определяли по ре-
зультатам подсчета числа мест имплантации и резорбции эмбрионов, под-
счётом количества мертвых и живых плодов. Тератогенные факторы ис-
следовали осмотром аномалий строения лицевого черепа, позвоночника,
конечностей, пальцев, хвоста и брюшной стенки.
Оценку мутагенного эффекта осуществляли методом подсчёта ано-
мальных головок сперматозоидов у 30 самцов 70-100 дневного возраста.
Лечебную и профилактическую эффективность Зимуна 4.24 исследо-
вали в трёх сериях опытов на 2 —5 месячных здоровых телятах и больных
острой формой катаральной бронхопневмонии.
На первом этапе испытывали различные дозировки и способы введе-
ния Зимуна 4.24 в сочетании с симптоматическим лечением при терапии
неспецифической бронхопневмонии телят. Для этого сформировали 7
групп подопытных животных по 5 голов в каждой. 1-6 группа включала
телят с признаками острой формы неспецифической катаральной брон-
хопневмонии. Здоровые телята служили контролем.
В процессе опыта учитывали клиническое состояние. До и на 10 сутки
после лечения проводили морфологические и биохимические исследова-
ния крови по общепринятым методам.
Для проведения второй серии научно-производственных опытов по
сравнению эффективности Зимуна 4.24 и антибиотикотерапии в сочета-
нии с симптоматическим лечением при терапии неспецифической брон-
хопневмонии телят сформировали 4 группы подопытных телят по 5 голов
в каждой. Здоровые животные служили контролем.
До лечения, через 30 и 60 суток проводили контрольное взвешивание
телят всех групп. До лечения и через 15 суток после первого дня терапии
проводили, морфологические и биохимические исследования крови. Все
исследования проводили по общепринятым в ветеринарии методикам.
Для изучения клеточных факторов естественной резистентности оп-
ределяли фагоцитарную активность нейтрофилов крови по методу B.C.
Гостева. Гуморальные факторы исследовали изучением бактерицидной и
лизоцимной активности сыворотки крови. Бактерицидную активность
определяли фотонефелометрическим методом по О. В. Смирновой и Т. А.
Кузьминой (1966) в модификации Ю.М. Маркова (1968) с соавт. Лизо-
цимную активность сыворотки крови исследовали по Ю. М. Маркову
(1974)
Для определения фагоцитарной активности клеточных элементов и по-
тенциальных возможностей естественной резистентности у телят исполь-
зовали внутрикожную пробу с гистамином по Д.Д. Новаку (1965). Гиста-
миновую пробу проводили до лечения, через 5, 15 и 30 суток после перво-
го дня терапии.
При введении Зимуна 4.24 телятам больным бронхопневмонией отме-
чали незначительный пирогенный эффект. Поэтому для оценки пироген-
ного эффекта проводили измерение температуры тела у телят в течение
4-х суток лечения утром до введения препарата и через 30, 60, и 120 ми-
нут после введения.
Для оценки профилактической эффективности препарата Зимун 4.24
при неспецифической бронхопневмонии было сформировано 2 группы
телят —опытная и контрольная. Опытная группа включала 25 голов телят
20 - 50 суточного возраста. Им осуществляли 3-х кратное внутримышеч-
ное введение Зимуна 4.24 в дозе 1 мл на голову с интервалом 48 часов.
Контрольная группа включала 25 телят того же возраста. Наблюдение
осуществляли в течение 6 месяцев с момента постановки на опыт. В тече-
ние этого срока осуществляли контроль за клиническим состоянием жи-
вотных опытной и контрольной групп. До и во время опыта все телята
подвергались плановым обработкам и вакцинации, согласно плану вете-
ринарных мероприятий. До и после проведения эксперимента проводили
взвешивание телят.
Статистическую обработку полученных цифровых данных осуществ-
ляли с помощью программы BIOSTAT для ЭВМ. Степень достоверности
между сравниваемыми средними величинами оценивали с помощью кри-
терия Стьюдента.
2.2. Результаты собственных исследований
2.2.1. Фармакологическая характеристика Зимуна 4.24
Зимун 4.24 препарат, разработанный учёными НПФ ≪Исследователь-
ский центр≫ и сотрудниками кафедры фармакологии и общей патологии
Новосибирского аграрного университета содержит генетически модифи-
цированную споровую биомассу бактерий Bacillus Subtilis штамм ВКПМ-
7048 и наполнитель. Препарат представляет собой прозрачную мутнова-
тую жидкость, при хранении допускается образование осадка желтовато-
белого цвета на дне флакона, который при встряхивании легко разбивает-
ся на равномерную взвесь. Препарат имеет слабовыраженный специфиче-
ский запах и солоноватый специфический вкус. Выпускают в стерильных
герметически упакованных флаконах по 10 мл. Срок хранения не менее 1
года при температуре 6 - 10 °С.
Штамм Bacillus Subtilis, входящий в состав препарата обладает высо-
кой антагонистической активностью к широкому спектру патогенных и
условно-патогенных микроорганизмов. На непатогенные штаммы Е. Coli
антагонистическим действием не обладает. Помимо этого стимулирует
регенерационные процессы в организме, активизирует обменные процес-
сы и биосинтез белка, нормализует окислительно-востановительные про-
цессы, повышает интенсивность роста молодняка и сохранность живот-
ных.
Спектр показаний для применения Зимуна 4.24 широк. Его можно ис-
пользовать для стимуляции клеточных и гуморальных факторов иммуни-
тета, профилактики и лечения заболеваний инфекционной и не инфекци-
онной этиологии, нормализации микробиоценозов организма животных
после лечения антибиотиками и другими антибактериальными химиоте-
рапевтическими средствами, а так же для повышения продуктивности
животных.
2.2.2. Токсикологическая характеристика препарата Зимун 4.24
В эксперименте по определению острой токсичности Зимуна 4.24 ги-
бели подопытных животных не наблюдалось, что говорит об отсутствии
токсических свойств при непродолжительном применении препарата. Ре-
зультаты исследования токсичности при нанесении на кожу и слизистые
оболочки указывают на отсутствие раздражающего действия Зимуна 4.24.
Оценивая степень опасности Зимуна 4.24 при длительном воздействии
на лабораторных животных так же не удалось обнаружить каких-либо
негативных последствий, а наоборот был выявлен стимулирующий эф-
фект на прирост живой массы, дыхательную функцию крови и фагоци-
тарную активность нейтрофилов белых мышей.
При оценке отдалённых последствий применения больших доз Зимуна
4.24 доказано, что он не обладает негативным действием на репродуктив-
ную функцию и не вызывает мутаций половых клеток лабораторных жи-
вотных. Следовательно, препарат Зимун 4.24 можно считать безопасным
средством для энтерального и парентерального применения.
2.2.3. Клиническое состояние, морфо-биохимический статус и
показатели естественной резистентности подопытных телят
При проведении двух серий опытов по определению терапевтической
эффективности Зимуна 4.24 у телят больных неспецифической бронхоп-
невмонией обнаружены характерные клинические признаки соответст-
вующие острой катаральной форме болезни. Серологической диагности-
кой исключены вирусные респираторные болезни - парагрипп —3 и ин-
фекционный ринотрахеит.
Обнаруженные клинические проявления бронхопневмонии сопровож-
дались существенными сдвигами в морфо-биохимическом статусе боль-
ных телят. Они касались достоверного снижения количества гемоглобина
в крови на 12,9 —22,7 %, эритроцитов на 10,3 —24,2 %. Соответственно
снижены цветной показатель и среднее содержание гемоглобина в одном
эритроците, что может говорить о нарушении дыхания и транспорта ки-
слорода к органам и тканям организма.
Количество лейкоцитов в крови больных животных было повышено на
30,3 - 67,2 %. В лейкограмме отмечаются явления базофилии, эозинофи-
лии, нейтрофилии со сдвигом ядра влево, а также моноцитоз.
Содержание общего белка в сыворотки крови больных телят ниже по-
казателя здоровых животных на 5,8 —16,7 %. Во фракционном составе
белков наблюдаются изменения, характеризующиеся достоверным сни-
жением доли альбуминовой фракции на 9,6 - 29,1%, повышением а-
глобулинов на 11,2 - 23,0 %, Р-глобулинов на 33,9 - 51,2 % и у-
глобулинов на 4,9 - 10,4 %. Содержание Р-липопротеидов в сыворотке
крови больных телят достоверно увеличено по сравнению со здоровыми
животными на 16,3 —23,5 %. Достоверно снижен в сыворотке крови боль-
ных телят уровень глюкозы на 41,1 - 50,4 %, активность аланинами-
нотрансферазы возрастала на 88,2 - 111,8 %, аспартатаминотрансферазы
на 31,3-50,0%.
При анализе показателей минерального обмена можно отметить сни-
жение кальция в сыворотке крови на 10,1 - 14 %. Щелочной резерв у те-
лят опытных групп достоверно снижен на 16,6 - 23,7 %.
Фагоцитарная активность крови и бактерицидная активность сыворот-
ки крови у больных телят достоверно ниже показателей здоровых живот-
ных, а лизоцимная активность сыворотки крови повышена. При проведе-
нии внутрикожной гистаминовой пробы у больных телят утолщение кож-
ной складки было ниже контрольных и составляло 1,3 - 1,5 мм, что явля-
ется отрицательной реакцией, указывающей на низкую барьерную функ-
цию организма.
2.2.4. Определение оптимальной дозы и способов введения Зимуна
4.24 для лечения неспецифической бронхопневмонии телят
Для постановки эксперимента по определению оптимальной дозы и
способа введения Зимуна 4.24 для лечения неспецифической бронхоп-
невмонии телятам 1-ой группы в качестве основного лечения применяли
внутримышечное введение Зимуна 4.24 в дозе 0,035 мл/кг живой массы
два раза в сутки. Телятам 2-ой группы внутримышечно инъецировали
препарат в дозе 0,07 мл/кг живой массы один раз в сутки. Телятам 3-ей
группы внутримышечно в дозе 0,14 мл/кг живой массы один раз в сутки.
Телятам 4-ой группы вводили внутривенно Зимун 4.24 в дозе 0,017 мл/кг
живой массы два раза в сутки, 5-ой группе - внутривенно 0,035 мл/кг жи-
вой массы один раз в сутки, 6-ой группе телят - 0,07 мл/кг живой массы
внутривенно один раз в сутки. Телятам всех опытных групп в качестве
симптоматического лечения применяли мукалтин внутрь в дозе 100 мг на
голову 2 раза в сутки; аскорбиновую кислоту внутрь по 300 мг на голову 2
раза в сутки и тривит внутримышечно 2 мл на голову однократно.
Все предложенные для испытания дозы и способы введения в орга-
низм препарата в сочетании с симптоматическим лечением обладали по-
ложительным влиянием на состояние больных бронхопневмонией телят.
Клиническое выздоровление наступало на 4 - 6 сутки терапии.
Под действием проведённой терапии изменялись морфо-
биохимические показатели крови. Так, в крови телят увеличивалось со-
держание гемоглобина и эритроцитов, снижалось количество лейкоцитов,
что указывает на повышение дыхательной и защитной функций крови.
После лечения телят произошло повышение уровня общего белка и
нормализация его фракционного состава, выражающееся в увеличении
процентного содержания альбуминов, уменьшении общего содержания
глобулинов, что свидетельствует о положительном лечебном эффекте.
Содержание глюкозы, каротина и общих липидов в сыворотке крови по-
сле лечения повышалось и недостоверно отличалось от показателей здо-
ровых телят.
При использовании Зимуна 4.24 один раз в сутки внутримышечно в
дозах 0,07 и 0,14 мл/кг живой массы и внутривенно в дозе 0,035 и 0,07
мл/кг живой массы, сокращались сроки клинического выздоровления
приблизительно на 24 часа, чем при внутримышечном введении в дозе
0,035 мл/кг живой массы и внутривенном в дозе 0,017 мл/кг живой массы
два раза в сутки.
Наиболее выраженные изменения морфо-биохимических показателей
крови и прироста живой массы отмечались при использовании Зимуна
4.24 один раз в сутки внутримышечно в дозах 0,07 и 0,14 мл/кг живой
массы и внутривенно в дозе 0,035 и 0,07 мл/кг живой массы.
Достоверных различий в результатах лечения телят Зимуном 4.24 при
внутримышечном и внутривенном введении не наблюдалось. Из-за тру-
доёмкости и определённого риска, возникающего при нарушении методи-
ки внутривенного введения лекарственных средств, наиболее приемле-
мым можно считать применение Зимуна 4.24 внутримышечно в дозах 0,07
и 0,14 мл/кг живой массы.
2.2.5. Сравнительная эффективность комплексной терапии с
использованием антибиотика и препарата Зимун 4.24
При проведении эксперимента телят 1 группы лечили антибиотиком
ципрофлоксацином —внутрь в дозе 250 мг на голову 2 раза в сутки. Вы-
бор данного препарата обусловлен чувствительностью к нему микрофло-
ры (метод диффузии в агар), выделенной из носовых истечений больных
телят. Вокруг 20-ти других антибиотиков зона задержки роста микробов
отсутствовала.
Телятам 2 группы применяли внутримышечное введение Зимуна 4.24
в дозе 0,07 мл/кг живой массы один раз в сутки. Телятам 3 группы Зимун
4.24 вводили так же, но с кратностью 2 раза в сутки. Телят 4 группы лечи-
ли Зимуном 4.24 внутримышечно в дозе 0,14 мл/кг живой массы один раз
в сутки. Животным всех групп применяли симптоматическое лечение
аналогичное предыдущему эксперименту. Препараты вводили до полного
клинического выздоровления.
В результате лечения телят ципрофлоксацином клиническое выздо-
ровление регистрировали на 7,0Ѓ}0,45 сутки, а при терапии Зимуном 4.24
на 4-5 сутки. Зависимость от дозы и кратности введения Зимуна 4.24 от-
сутствовала.
В процессе лечения телят всех групп произошли существенные изме-
нения показателей крови телят (табл. 1).
1. Показатели крови телят на 15 сутки после начала лечения
При терапии ципрофлоксацином количество гемоглобина, эритроци-
тов по сравнению с показателями здоровых животных различались не
достоверно. Цветной показатель, находящийся у больных телят ниже фи-
зиологической нормы, после терапии увеличивался на 19,3 %, а среднее
содержание гемоглобина в одном эритроците на 19,6 %. Перечисленные
показатели достоверно ниже таковых у здоровых животных, но при этом
соответствуют нормативным значениям.
При лечении Зимуном 4.24 данные показатели так же достигают зна-
чений здоровых животных. При этом данные величины выше по сравне-
нию с животными из группы, где применяли антибиотик.
После лечения телят с использованием антибиотика ципрофлоксацина
происходит достоверное снижение общего числа лейкоцитов на 39,9 % по
сравнению с показателем больных животных и на 23,6 % по сравнению со
здоровыми животными (табл. 2).
В лейкограмме происходят сдвиги, направленные на увеличение про-
цента базофилов и нейтрофилов, особенно палочкоядерных и снижения
лимфоцитов и моноцитов. По сравнению с показателями здоровых жи-
вотных отмечаются явления эозинопении, нейтрофилии со сдвигом ядра
влево и моноцитопении. Указанные изменения лейкограммы характерны
для животных с пониженным иммунитетом и антитоксической функцией.
После лечения телят Зимуном 4.24 количество лейкоцитов по сравне-
нию со здоровыми животными ниже на 7,3 -11,4 %, по сравнению с теля-
тами, которых лечили ципрофлоксацином количество лейкоцитов повы-
шено на 9,6 - 14,6 %. В лейкограмме после лечения Зимуном 4.24 проис-
ходит снижение базофилов, эозинофилов, юных и палочкоядерных ней-
трофилов; повышение доли лимфоцитов и моноцитов и незначительно
сегментоядерных нейтрофилов. В сравнении с группой здоровых телят
повышено число лимфоцитов и моноцитов. По сравнению с животными
из группы, где применяли ципрофлоксацин достоверно повышено число
эозинофилов, лимфоцитов и моноцитов; снижено палочкоядерных и сег-
ментоядерных нейтрофилов. Указанные изменения говорят о благоприят-
ном исходе болезни и усилении защитных сил организма у телят, кото-
рым применяли Зимун 4.24.
2. Количество лейкоцитов и лейкограмма крови телят после лечения
После лечения телят всех групп происходит нормализация биохимиче-
ских показателей, характеризующих состояние белкового, углеводного,
минерального обменов и активность ферментов переаминирования
(табл.3).
Так, после лечения телят 1-ой группы содержание общего белка в сы-
воротке крови повышалось на 3,8 %, а липопротеидов понижалось на
7,3%. По сравнению со здоровыми животными показатели недостоверны.
Соотношение белковых фракций после лечения направлено на повыше-
ние доли альбуминов до 41,6%, глобулинов на 11,6% и снижения
глобулинов на 24,2%. По сравнению со здоровыми животными достовер-
но повышен процент глобулинов.
После лечения телят 2-ой группы изменения носили ту же направлен-
ность, что и в 1 группе, но степень выраженности более достоверна. По-
сле терапии Зимуном 4.24 количество общего белка, альбуминов и
глобулинов достоверно выше, а глобулинов и липопротеидов
ниже, чем у животных, которых лечили ципрофлоксацином, а количество
общего белка выше, чем у здоровых телят, за счёт глобулиновой фрак-
ции.
После лечения телят 1-ой группы происходит повышение уровня глю-
козы в сыворотке крови на 28,1 %, общего кальция на 6,8 %, неорганиче-
ского фосфора на 2,2 % и щелочного резерва на 14,6 %; понижение ак-
тивности ферментов АлАТ и АсАТ на 40,7 и 7,7 %. Разница показателей
по сравнению со здоровыми животными не достоверна.
3. Биохимические показатели сыворотки крови телят после лечения
Изменения биохимических показателей сыворотки крови у телят 2,3 и
4-ой групп отличались друг от друга недостоверно. После лечения проис-
ходили аналогичные изменения, что и после лечения телят 1-ой группы.
Так, у телят 2,3 и 4 групп на 15 сутки после начала терапии происходило
увеличение концентрации глюкозы в сыворотке крови соответственно на
34,2; 40,0 и 42,5 %, общего кальция на 5,9; 9,4 и 15,8 % и щелочного ре-
зерва на 10,5; 20,5 и 22,6 %; понижалась активность ферментов АлАТ на
31,8; 33,9 и 43,7 % и АсАТ.на 19,0; 20,2 и 19,5 %. Разница показателей по
сравнению со здоровыми животными не имеет достоверных различий.
Обнаруженные изменения биохимических показателей сыворотки кро-
ви указывают на восстановление нарушенных звеньев в обменных про-
цессах после лечения. Увеличение содержания общего белка в сыворотке
крови указывает на нормализацию белкового обмена и является показате-
лем, характеризующим восстановление продуктивности телят после вы-
здоровления. Повышение доли альбуминовой фракции связано с повыше-
нием онкотического давления, снижением выхода жидкой части крови в
легочную ткань и просвет дыхательных путей, улучшением в конечном
итоге дренажной функции воздухоносных путей и легочного газообмена.
Повышение глобулинов после лечения телят Зимуном 4.24 говорит о
повышении образования антител и стимуляции неспецифической рези-
стентности, снижение этого показателя после терапии ципрофлоксацином
может служить следствием иммуносупрессивного действия данного анти-
биотика. Снижение липопротеидов в сыворотке крови после лечения
телят является следствием повышения функциональной активности ле-
гочной ткани, восстановления липидного и белкового обменов.
Увеличение количества глюкозы в сыворотке крови и достижение
нормы после лечения говорит о нормализации функции печени и почек,
отсутствии ацидоза. Концентрация глюкозы ниже у телят, которых лечи-
ли ципрофлоксацином, при этом разница по сравнению со здоровыми жи-
вотными недостоверна.
Повышение концентрации общего кальция в сыворотке крови и дос-
тижении нормы кальций-фосфорного соотношения может служить пока-
зателем нормализации минерального обмена и говорит о положительных
результатах лечения.
Снижение активности ферментов переаминирования, свидетельствует
о восстановлении функциональной активности печени и сердечной мыш-
цы. Повышение щелочного резерва до уровня здоровых телят указывает
на отсутствие ацидоза вследствие восстановления функции легочной тка-
ни и дыхательной функции крови.
Терапия с использованием ципрофлоксацина и Зимуна оказала выра-
женное влияние на показатели неспецифической резистентности телят
(рис. 1,2).
Под действием ципрофлоксацина произошло подавление защитных
сил организма, выражающееся снижением фагоцитоза, лизоцимной ак-
тивности сыворотки крови и отрицательным результатом гистаминовой
пробы. Повышение под действием ципрофлоксацина бактерицидной ак-
тивности сыворотки крови возможно связано с циркуляцией его продук-
тов в организме телят.
Под действием терапии с использованием Зимуна 4.24 произошло вы-
сокодостоверное повышение всех показателей неспецифической рези-
стентности телят. Оценивая результаты гистаминовой пробы, на 5-ые су-
тки после начала лечения происходит значительное утолщение кожной
складки до 5,5-6,5 мм - это положительная реакция, свидетельствующая о
стимуляции фагоцитарной активности клеточных элементов и потенци-
альных возможностей естественной резистентности.
Все показатели неспецифической резистентности телят выше показа-
телей здоровых животных, что указывает на стимуляцию иммунитета Зи-
муном 4.24. Характер происходящих изменений неспецифической рези-
стентности телят не зависел от кратности и схемы назначения препарата.
Однако гистаминовой пробой выявлено, что внутримышечное введение
Зимуна 4.24 в дозе 0,07 мл/кг живой массы 2 раза в сутки обладает более
продолжительным стимулирующим эффектом на активность клеточных
элементов, чем использование аналогичной дозы один раз в сутки, а под
действием дозы 0,14 мл/кг наблюдается несколько менее выраженная ре-
акция со стороны иммунной системы.
Рис 1. Показатели неспецифической резистентности телят до и после лечения
Рис. 2. Результаты внутрикожной гистаминовой пробы
После лечения телят всех групп происходило повышение живой мас-
сы, что говорит о положительных результатах лечения. Парентеральное
введение препарата Зимун 4.24 помимо лечебного действия обладает сти-
мулирующим влиянием на прирост живой массы телят, что выражается
большей интенсивностью роста через 30 суток после начала лечения по
сравнению со здоровыми животными (рис 3).
Рис. 3. Среднесуточный прирост живой массы до на 30 и 60
сутки после начала лечения, кг
Экономическая эффективность на один рубль затрат при лечении ци-
профлоксацином составляет 5,71 руб., при лечении Зимуном 4.24 в дозе
0,07 мл/кг ж.м. один раз в сутки - 9,26 руб., при использовании аналогич-
ной дозы два раза в сутки - 7,49 руб. и при использовании дозы 0,14 мл/кг
ж.м. один раз в сутки - 7,28 руб.
При проведении эксперимента отмечено, что при внутримышечном
введении Зимуна 4.24 телятам больным бронхопневмонией наблюдался
непродолжительный пирогенный эффект. Максимальное повышение тем-
пературы тела происходило на 1-2 сутки лечения через 30 минут после
введения (на 0,79 - 1,24 С), через 60 минут температура понижалась (по-
вышение на 0,11 - 0,32 °С), а через 120 минут возвращалась к исходному
значению. При выздоровлении телят происходит снижение пирогенного
эффекта. Какой - либо зависимости повышения температуры тела от дозы
препарата не наблюдалось. В меньшей степени пирогенный эффект свя-
зан с количеством инъекций препарата. Это следует из того, что при ле-
чении телят 3 группы число инъекций препарата было в 2 раза больше,
чем при лечении телят 2-ой и 4-ой групп, а разность температур в зависи-
мости от сроков измерения не имела достоверных отличий.
2.2.6. Эффективность препарата Зимун 4.24 при профилактике не-
специфической бронхопневмонии телят
В течение 6 месяцев наблюдения за телятами отмечали, что ни один
телёнок из опытной группы не заболел, а из контрольной заболело 7 телят
с признаками поражения органов респираторного тракта. При диагности-
ке был поставлен диагноз острая катаральная бронхопневмония. Заболе-
ваемость составила 28 %.
Больных телят лечили Зимуном 4.24 в сочетании с симптоматическим
лечением (аскорбиновая кислота, мукалтин и тривит в вышеуказанных
дозах). Зимун 4.24 вводили внутримышечно в дозе 0,07 мл/кг живой мас-
сы 1 раз в сутки. В результате терапии все больные телята выздоровели на
4-6 сутки лечения, падежа не было.
У телят опытной группы среднесуточный прирост живой массы был
выше в среднем на 18,5 %, чем у животных контрольной группы. При
этом для профилактики телят опытной группы израсходовано 75 мл пре-
парата Зимун 4.24, что в среднем составляет 3 мл на 1 голову, а для лече-
ния телят контрольной группы потрачено около 200 мл препарата, что в
среднем составляет 8 мл на 1 голову. При этом за 6 месяцев наблюдения в
среднем с каждого телёнка дополнительно получено 14,8 кг живой мас-
сы, чем при проведении лечебных мероприятий с использованием анало-
гичного препарата.
Экономическая эффективность проведённых профилактических меро-
приятий на 1 рубль затрат составляет 19,2 руб.
ВЫВОДЫ
1. Препарат Зимун - 4.24 не обладает острой и хронической токсично-
стью, кумулятивным эффектом, не вызывает развития септических
процессов и воспалительных реакций. Его длительное парентеральное
применение в высоких дозах не оказывает повреждающего воздейст-
вия на внутренние органы и картину крови белых мышей, он не обла-
дает негативным влиянием на репродуктивную функцию и не вызы-
вает мутаций половых клеток.
2. Введение белым мышам Зимуна 4.24 в течение 30 суток оказывает
стимулирующий эффект на прирост живой массы, дыхательную
функцию крови и фагоцитарную активность нейтрофилов.
3. Препарат Зимун 4.24 обладает непродолжительным (30-60 минут)
пирогенным действием на больных бронхопневмонией телят. В про-
цессе выздоровления происходит ослабление пирогенного эффекта.
4. Зимун 4.24 при внутримышечном и внутривенном способах введения
в сочетании с симптоматическим лечением обладает выраженным те-
рапевтическим эффектом при острой катаральной бронхопневмонии
телят. Наиболее эффективным и экономически оправданным оказа-
лось внутримышечное введение Зимуна 4.24 в дозе 0,07 мл/кг живой
массы один раз в сутки в течение 5 суток. Экономическая эффектив-
ность на один рубль затрат составляет 9,26 руб.
5. Под действием Зимуна 4.24 происходит стимуляция прироста живой
массы, дыхательной функции крови, белкового обмена и неспецифи-
ческой резистентности телят.
6. Лечение неспецифической бронхопневмонии телят ципрофлоксаци-
ном в сочетании с симптоматическим лечением менее эффективно,
чем Зимуном 4.24. Под действием ципрофлоксацина происходит уг-
нетение неспецифической резистентности и функциональной актив-
ности печени телят. Экономическая эффективность на один рубль за-
трат составляет 5,71 руб.
7. Эффективность Зимуна 4.24 при профилактике неспецифической
бронхопневмонии телят составила 100 %. При этом прирост живой
массы оказался на 18,5 % выше, а препарата израсходовано в 2,7 раза
меньше, чем при проведении лечебных мероприятий. Экономическая
эффективность на один рубль затрат составила 19,2 руб.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Для лечения телят, больных острой формой катаральной бронхопнев-
монии, рекомендуем внутримышечное введение Зимуна 4.24 в дозе
0,07 мл/кг живой массы 1 раз в сутки до выздоровления в сочетании с
мукалтином из расчёта 100 мг на голову 2 раза в сутки, аскорбино-
вой кислотой по 300 мг на голову 2 раза в сутки и внутримышечным
введением тривитамина в дозе 2 мл на голову однократно.
2. С профилактической и ростостимулирующей целью рекомендуем
введение Зимуна 4.24 трёхкратно внутримышечно с интервалом 48
часов в дозе 1 мл на 1 голову.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Мифтахутдинов А.В. Изучение острой токсичности и раздражающего
воздействия пробиотического препарата Зимун - 4.24. Актуальные
проблемы ветеринарной медицины. Материалы международной на-
учно-практической конференции, посвященной юбилею П.С. Лазаре-
ва. УГАВМ - 2003, с. 78-79.
2. Мифтахутдинов А.В. Влияние длительного воздействия препарата
Зимун - 4.24 на некоторые гематологические показатели и фагоци-
тарную активность белых мышей. Материалы VII межрегиональной
научно-практической конференции ≪Перспективные направления на-
учных исследований молодых учёных и специалистов Урала и Сиби-
ри≫. Троицк - 2003, с. 22-25.
3. Мифтахутдинов А.В. Токсическое действие препарата Зимун - 4.24 на
лабораторных животных. Актуальные проблемы биологии и ветери-
нарной медицины мелких домашних животных. Троицк - 2003, с 48-
52.
4. Мифтахутдинов А.В. Оценка отдалённых действий препарата Зимун -
4.24 на белых мышах. Материалы Российской научно-практической
конференции ≪Новые пробиотические и иммунотропные препараты в
ветеринарии≫. Новосибирск-2003, с 69-71
5. Мифтахутдинов А.В.Скрининг препарата Зимун - 4.24 на лаборатор-
ных животных/ А.В. Мифтахутдинов, И.М. Самородова, Н.Т. Мифта-
хутдинов, С.Ж. Гюрджи-Оглы// Материалы Российской научно-
практической конференции ≪Новые пробиотические и иммунотроп-
ные препараты в ветеринарии≫. Новосибирск-2003, с. 65-68.
6. Мифтахутдинов А.В. Токсикологическая характеристика препарата
Зимун 4.24 // БИО - №07. - 2004. - с. 21-24.
7. Мифтахутдинов А.В., Десятник В.И., Самородова И.М. Патоморфо-
логия органов и тканей белых мышей при длительном воздействии
препарата Зимун - 4.24. Материалы VIII межрегиональной научно-
практической конференции ≪Перспективные направления научных
исследований молодых учёных и специалистов Урала и Сибири≫.
Троицк - 2004, с 76-79.
На правах рукописи
Мифтахутдинов Алевтин Викторович
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
И ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА ЗИМУН 4.24
ПРИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ
БРОНХОПНЕВМОНИИ ТЕЛЯТ
16.00.04 - Ветеринарная фармакология с токсикологией
Автореферат диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Сдано в набор 11.01.2005 г. Подписано в печать 13.01.2005 г.
Формат 60x84/16. Объем 1 печ. л. Тираж 100 экз.
Заказ № 571. Гарнитура Times New Roman
Издательский центр УГАВМ, лицензия ЛР №01252 от 31 октября 1997 г.
457100, г. Троицк, Челябинская обл., ул. Гагарина 13.
Тел.(35163)2-64-75
